耐藥細胞構(gòu)建的原理和實驗要點說明

來源：上海一研生物科技有限公司 2021年04月18日 19:49

　　耐藥細胞構(gòu)建的原理：

　　細胞與低劑量的藥物長期接觸，引起細胞本身藥物化學過程的改變，細胞膜上出現(xiàn)Pgp糖蛋白，使細胞逐漸對藥物耐受，隨著藥物濃度的遞增，其耐受程度逐漸加強。

　　耐藥細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

　　1.研究的對象是活細胞

　　在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

　　2.研究條件可以人為控制

　　pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，產(chǎn)品僅供科研可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

　　3.研究的樣本可以達到比較均一性

　　通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

　　4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

　　采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

　　耐藥細胞的實驗要點說明：

　　1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

　　2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

　　3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

　　4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

　　5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

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