非洲綠猴腎細(xì)胞在醫(yī)藥研究中廣泛應(yīng)用
Vero細(xì)胞來(lái)源于非洲綠猴腎細(xì)胞,被成功的用來(lái)培養(yǎng)狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗,在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻(xiàn),在醫(yī)藥研究中廣泛應(yīng)用。
形態(tài):上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
注釋:該細(xì)胞是日本千葉大學(xué)的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養(yǎng)出來(lái)的。
培養(yǎng)液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉), 10%胎牛血清
傳代:吸去培養(yǎng)液。 用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會(huì)抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘,直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液,用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。(以1:3至1:6為宜,傳代期間培養(yǎng)液每周更換2-3次)
凍存: 95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。
真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染是分子生物學(xué)研究中的強(qiáng)有力工具。其中脂質(zhì)體介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染具有結(jié)果可靠可重復(fù)性強(qiáng)的特點(diǎn)。陽(yáng)離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染率高低決定于下列參數(shù),如脂質(zhì)體的細(xì)胞毒性、轉(zhuǎn)染的細(xì)胞種類、DNA用量、DNA與脂質(zhì)體的比例以及脂質(zhì)體的濃度。其中所轉(zhuǎn)染細(xì)胞種類對(duì)轉(zhuǎn)染效率影響大。對(duì)不同的細(xì)胞,需要采取不同的轉(zhuǎn)染條件,才能獲得高轉(zhuǎn)染效率和低毒性。
非洲綠猴腎細(xì)胞可能作為表達(dá)外源蛋白質(zhì)的有用細(xì)胞。作為一種連續(xù)傳代的靈長(zhǎng)類細(xì)胞,Vero細(xì)胞的糖基化酶可能與人類的相似??梢源笠?guī)模培養(yǎng),已經(jīng)用于脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗的生產(chǎn)。
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