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瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟

來源:上海金鵬分析儀器有限公司   2021年05月11日 15:42  

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟:
 為了制備凝膠,將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合至所需濃度,并在微波爐中加熱使其熔化。
瓊脂糖凝膠濃度
1. 所用瓊脂糖的百分比取決于要分離的片段的大小。
2. 瓊脂糖的濃度是指瓊脂糖相對于緩沖液體積的百分比(w / v),瓊脂糖凝膠通常在0.2%至3%的范圍內(nèi)。
3. 瓊脂糖濃度越低,DNA片段遷移越快。
4. 通常,如果目的是分離大的DNA片段,則應(yīng)使用低濃度的瓊脂糖,如果目的是分離小的DNA片段,則建議使用高濃度的瓊脂糖。
將溴化乙錠添加到凝膠中(**終濃度為0.5 ug / ml),以促進電泳后DNA的可視化。
將溶液冷卻至約60°C后,將其倒入裝有樣品梳子的澆鑄盤中,使其在室溫下固化。
凝膠固化后,將梳子移開,注意不要撕裂孔的底部。
仍在塑料托盤中的凝膠水平插入電泳儀并用緩沖液覆蓋。
然后將含有DNA與上樣緩沖液混合的樣品吸移到樣品孔中,將蓋子和電源線放在設(shè)備上,并施加電流。
可以通過觀察電極上的氣泡確認電流。
鑒于其負電荷,DNA將遷移至通常為紅色的正電極。
. DNA遷移到凝膠中的距離可以通過肉眼監(jiān)測跟蹤染料(如溴酚藍和二甲苯氰染料)的遷移來判斷。


以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟。
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動部分收集器等十幾個系列產(chǎn)品的廠家,歡迎大家前來訂購
 

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