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齊岳-化學發(fā)光試劑吖啶脂/魯米諾/堿性磷酸酶ALP-AMPPD粉末

來源:西安齊岳生物科技有限公司   2021年05月17日 11:33  

1.化學發(fā)光分析的基本原理

化學發(fā)光分析含有分析和化學發(fā)光分析兩個系統(tǒng)。分析系統(tǒng)是將化學發(fā)光物質(zhì)或酶作為標記物,直接標記在抗原或抗體上,經(jīng)過抗原與抗體反應(yīng)形成抗原一抗體復合物?;瘜W發(fā)光分析系統(tǒng)是在反應(yīng)結(jié)束后,加入氧化劑或酶的發(fā)光底物,化學發(fā)光物質(zhì)經(jīng)氧化劑的氧化后,形成一個處于激發(fā)態(tài)的中間體,會發(fā)射光子釋放能量以回到穩(wěn)定的基態(tài),發(fā)光強度可以利用發(fā)光信號測量儀器進行檢測。根據(jù)化學發(fā)光標記物與發(fā)光強度的關(guān)系,可利用標準曲線計算出被測物的含量。

2.化學發(fā)光分析法的類型

化學發(fā)光分析法根據(jù)標記物的不同可分為三大類,即化學發(fā)光分析、化學發(fā)光酶分析

和電化學發(fā)光分析法。

2.1 化學發(fā)光分析

化學發(fā)光分析是用化學發(fā)光劑直接標記抗體或抗原的一類測定方法。目前常見的標記物主要為魯米諾類和吖啶酯類化學發(fā)光劑。

2.1.1 魯米諾類標記的化學發(fā)光分析:魯米諾類物質(zhì)的發(fā)光為氧化反應(yīng)發(fā)光。在堿性溶液中,魯米諾可被許多氧化劑氧化發(fā)光,其中H2o2為常用。因發(fā)光反應(yīng)速度較慢,需添加某些酶類或無機催化劑。酶類主要是辣根過氧化物酶(HRP),無機類包括O3、鹵素及Fe3 、Cu2 、Co2 和它們的配合物。早期主要用于無機物和有機生物小分子的測定,靈敏度因標記后發(fā)光強度降低而降低。人們發(fā)現(xiàn)發(fā)光體系中加入某些酚類及其衍生物、胺類及其衍生物和苯基硼酸衍生物對體系的發(fā)光均有作用,發(fā)光強度可1000倍,并且“本底”發(fā)光降低,發(fā)光時間也得到延長。這些劑的使用,使化學發(fā)光分析在蛋白、核酸分析領(lǐng)域得到的應(yīng)用。

2.1.2 吖啶酯類標記的化學發(fā)光分析:吖啶酯用于CLIA由于熱穩(wěn)定性不是很好,經(jīng)研究合成了更穩(wěn)定的吖啶酯衍生物。在H2o2和OH一條件下,吖啶酯類化合物能迅速發(fā)光,量子產(chǎn)率很高,如吖啶芳香酯的量子產(chǎn)率可達0.05,吖啶酯作為標記物用于分析,發(fā)光體系簡單、,不需要加入催化劑,且標記,本底低。這些特點引起廣大分析診斷工作者的興趣。

2.2 化學發(fā)光酶分析

化學發(fā)光酶分析(Chemiluminescent enzymeimmunoassay,cLEIA)屬酶分析,只是酶反應(yīng)的底物是發(fā)光劑,操作步驟與酶免分析*相同:以酶標記生物活性物質(zhì)進行反應(yīng),反應(yīng)復合物上的酶再作用于發(fā)光底物,在信號試劑作用下發(fā)光,用發(fā)光信號測定儀進行發(fā)光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP )和堿性磷酸酶(ALP),它們有各自的發(fā)光底物。HRP常用發(fā)光底物是魯米諾及其衍生物。在CLEIA中,使用過氧化物酶標記抗體,進行反應(yīng)后,利用魯米諾作為發(fā)光底物,在過氧化物酶和起動發(fā)光試劑(NaOH和H2o2)作用下魯米諾發(fā)光,酶反應(yīng)物中酶的濃度決定了化學發(fā)光的強度。此傳統(tǒng)的化學發(fā)光體系(HRP-H2O2-LUMINOL)為幾秒內(nèi)瞬時閃光,存在發(fā)光強度低、不易測量等缺點。后來,在發(fā)光系統(tǒng)中加入發(fā)光劑,以發(fā)光信號,并在較長的時間內(nèi)保持穩(wěn)定,便于重復測量,從而分析靈敏度和性。

堿性磷酸酶(ALP)已用于酶聯(lián)分析和核酸雜交分析。堿性磷酸酶和1,2.二氧環(huán)乙烷構(gòu)成的發(fā)光體系是目前重要、靈敏的一類化學發(fā)光體系。這類體系中具有的是ALP-AMPPD發(fā)光體系。在溶液中AMPPD的磷酸酯鍵很穩(wěn)定,非酶催化的水解慢,在pHl2的0.05 mol/L碳酸鈉緩沖溶液中,分解半衰期可達74年,幾乎沒有試劑本身的發(fā)光背景。AMPPD為磷酸酯酶的直接發(fā)光底物,可用來檢測堿性磷酸酶或抗體、核酸探針及其他配基的結(jié)合物。ALP-AMPPD發(fā)光體系具有高的靈敏度,對標記物ALP的檢測限達10-21 mol,是靈敏的測定方法之一。對AMPPD加以改進,獲得具有反應(yīng)動力學和更高

靈敏度的產(chǎn)物:CSPD、CDP-Star。這些體系已用于基因和病原體DNA的鑒定。

2.3 電化學發(fā)光分析

電化學發(fā)光分析(Electrochemiluminescence,ECL)是指由電化學反應(yīng)引起的化學發(fā)光過程。ECL的反應(yīng)在電極表面進行,發(fā)光底物為三聯(lián)吡啶釕[Ru(byp)2+3 ],三丙胺(TPA)用來激發(fā)光反應(yīng)。在陽極表面,兩種物質(zhì)同時失去電子。在電極板上Ru(byp)2+3 被氧化成Ru(byp)3+3,TPA也被氧化成陽離子自由基(TPA+# ),TPA+#自發(fā)地釋放一個質(zhì)子而變成非穩(wěn)定分子(TPA* ),將一個電子遞給Ru(byp)3+3,形成激發(fā)態(tài)的Ru(byp)2+3。Ru(byp)3+3在衰減的同時發(fā)射一個波長為620NM的光子,重新回到基態(tài)Ru(byp)2+3。這一過程在電極表面反復進行,產(chǎn)生、穩(wěn)定的連續(xù)發(fā)光,并不斷。

ECL的突出優(yōu)點是:①標記分子小,可實現(xiàn)多標記,標記物穩(wěn)定;②發(fā)光時間長,靈敏度高;③光信號線性好,動力學范圍寬,過6個數(shù)量級;④可重復測量,重現(xiàn)性好;⑤可實現(xiàn)多元檢測和均相分析;⑥,完成一個樣品的分析通常18 min;⑦可實現(xiàn)全自動化。由于電化學發(fā)光分析具有性,是一種很有發(fā)展前途的分析法,日益受到人們的重視,目前已應(yīng)用于抗原、半抗原及抗體的檢測。

 

西安齊岳生物科技有限公司有自己的有機合成實驗室,可以生產(chǎn)合成化學發(fā)光試劑,我們可以提供的產(chǎn)品有化學發(fā)光試劑、化學發(fā)光底物、發(fā)光標記物、發(fā)光劑、染料探針類、微生物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。我公司致力于研究聚合物材料并用于科研靶向和科研傳遞的科研領(lǐng)域中。我們還可以接受定制合成服務(wù),,對科研機構(gòu)支持。

 

相關(guān)產(chǎn)品列表

CDP Star 160081-62-9
CSDP 142456-88-0
(4-氯苯巰基)(10-甲基-9,10-二氫化吖啶亞甲基)磷酸二鈉鹽/APS-5 193884-53-6
吖啶鹽(NSP-SA-NHS) 199293-83-9
吖啶酯(NSP-DMAE-NHS) 194357-64-7
AMPPD系列
SYBR Green I 163795-75-3 
PICO Green 177571-06-1
3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸內(nèi)鹽(CHAPS) 75621-03-3
2-丁酮酸鈉鹽;2-羰基丁酸鈉鹽;a-丁酮酸鈉鹽 2013-26-5
β-雌二醇-3-(β-D-葡萄糖苷酸)鈉鹽 14982-12-8
TOOS  82692-93-1
N-(2-羥基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺鈉鹽 82692-88-4
磷酸烯醇式丙酮酸單環(huán)己胺鹽 10526-80-4
魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨 521-31-3
異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼 3682-14-2
吖啶酯DMAE-NHS 115853-74-2
吖啶酰肼NSP-SA-ADH
吖啶酯ME-DMAE-NHS
吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH
吖啶酯-T4結(jié)合物
吖啶酯-T3結(jié)合物
吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺
吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物
吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物
-T4結(jié)合物
化學發(fā)光分析試劑及標記物
-T3結(jié)合物
-NHS活性酯 35013-72-0
吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH
吖啶酯NSP-DMOAE-NHS
吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHS
Cy3-NHS酯 146368-16-3
Cy7-NHS酯
5-羧基熒光素-NHS酯 92557-80-7
6-羧基熒光素-NHS酯 92557-81-8
5(6)-羧基熒光素-NHS酯 117548-22-8
6-羧基熒光素 3301-79-9
酚磺酞DIDNTB
丹磺酰氯 605-65-2
異魯米諾ABEI-DSC
光澤精 2315-97-1
 
 
以上內(nèi)容來自齊岳小編zzj 2021.5.17

 

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