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核酸印跡

來(lái)源:上海金鵬分析儀器有限公司   2021年05月24日 15:55  

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于核酸印跡:
    
       核酸印跡是一種成熟的技術(shù),用于鑒定先前在凝膠中分離的特定核苷酸序列的存在。(
Southern印跡以其**者英**生物學(xué)家Edwin Southern命名。在Southern印跡中,分析DNA,在Northern印跡中如果是RNA。在這兩種情況下,來(lái)自完整凝膠的DNARNA都將轉(zhuǎn)移到一塊硝酸纖維素膜或尼龍膜上。然后將膜暴露于雜交探針,即具有特定序列的單個(gè)DNA片段,要確定其在靶DNA(或RNA)中的存在。對(duì)探針DNA進(jìn)行標(biāo)記,以便可以通過(guò)射線照相,熒光或化學(xué)發(fā)光法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。
 
印跡是核酸從凝膠到膜的轉(zhuǎn)移,這通常使用毛細(xì)管轉(zhuǎn)移方法完成。在此過(guò)程中,將凝膠放置在紙芯的頂部,該紙芯浸入包含轉(zhuǎn)移緩沖液的容器中。膜夾在凝膠和一堆吸收性材料(通常是干紙巾)之間,該吸收性材料通過(guò)毛細(xì)管作用使轉(zhuǎn)移緩沖液通過(guò)凝膠。然后,凝膠中的核酸分子被緩沖液攜帶并固定在膜上。真空吸印是另一種越來(lái)越流行的吸印程序,因?yàn)樗俣雀烨一厥章屎芨?。真空印跡法還使用緩沖液流將核酸帶轉(zhuǎn)移到膜上,但是它使用真空而不是毛細(xì)管作用來(lái)創(chuàng)建該流。
 
一旦轉(zhuǎn)移完成,在凝膠上的所有核酸帶就被固定(印跡)在膜上,雜交過(guò)程可能開(kāi)始。將膜與一小段DNARNA(探針)一起孵育,該DNARNA的序列與膜中特定的DNARNA序列互補(bǔ)。這允許探針與膜上的特定DNA片段雜交或結(jié)合。探針先前已被標(biāo)記,通常用放射性原子,熒光染料標(biāo)記或用酶標(biāo)記,該酶在與合適的底物孵育后會(huì)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào)。雜交后,標(biāo)記的探針允許從膜上許多不同的DNA片段中檢測(cè)目標(biāo)DNA片段。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于核酸印跡。
 
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測(cè)定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠家,歡迎大家前來(lái)訂購(gòu)
 

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