手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
噬菌體篩選是一個(gè)非常特殊的物種，以寄生細(xì)菌為生。病毒的繁殖方式是通過(guò)改造宿主細(xì)胞的運(yùn)作方式，使其產(chǎn)生更多的病毒而不再分裂新的細(xì)胞。一個(gè)病毒侵入細(xì)菌之后，幾個(gè)小時(shí)的時(shí)間內(nèi)就會(huì)復(fù)制出數(shù)以千計(jì)的病毒并釋放出來(lái)，然后新的病毒又會(huì)進(jìn)入新的循環(huán)。這種指數(shù)式增長(zhǎng)的能力使噬菌體可以*滅絕它們的宿主種群，進(jìn)而自身也會(huì)滅絕——這就是公地悲劇在生物界的例子。一個(gè)比較“謹(jǐn)慎”的噬菌體種群會(huì)降低自己的增殖速率。
能與宿主發(fā)生特異性結(jié)合并注入其DNA，如能發(fā)生增殖并使宿主細(xì)菌迅速裂解引起溶菌反應(yīng)的噬菌體，稱(chēng)為裂解性或毒性噬菌體；與細(xì)菌DNA同步復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳給后代，不會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌裂解，但在外界條件的刺激下，可從宿主DNA中剪接出來(lái)，利用宿主細(xì)胞內(nèi)的酶系和蛋白進(jìn)行自我復(fù)制，引起溶菌反應(yīng)而釋放出噬菌體，稱(chēng)為溶源性噬菌體。由于溶源性細(xì)菌能抵抗相應(yīng)烈性噬菌體的溶菌作用，不適合用與持續(xù)的噬菌體治療，所以噬菌體治療必須選用烈性噬菌體。裂解性噬菌體在溶解其特異性宿主細(xì)菌時(shí)十分有效，而且其殺死細(xì)菌的機(jī)制與抗生素不同，已成為目前抗生素替代品中的研究熱點(diǎn)。
目前，噬菌體篩選的篩選工作已經(jīng)成為噬菌體領(lǐng)域發(fā)展的瓶頸問(wèn)題，特別是對(duì)于一些稀有的特殊目標(biāo)菌株如古細(xì)菌、條件菌株等，噬菌體的篩選工作異常艱難。另外，噬菌體的篩選效率決定了噬菌體制劑的研發(fā)效率，是一款噬菌體制劑有效性的決定因素?，F(xiàn)在常用的噬菌體篩選方案是通過(guò)將采集的噬菌體分離原液直接與處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌液進(jìn)行混合，使樣品中的噬菌體顆粒與其目標(biāo)菌株結(jié)合后進(jìn)入噬菌體繁殖復(fù)制周期，從而達(dá)到富集噬菌體的目的。然而，應(yīng)用該方法進(jìn)行篩選時(shí)，常常由于受到噬菌體分離液體積的限制，無(wú)法同時(shí)進(jìn)行多株宿主菌的噬菌體篩選工作。同時(shí)，如果降低單次富集的噬菌體分離液的體積則會(huì)大大降低噬菌體顆粒與宿主菌接觸的概率，降低篩出率。因此，為了滿(mǎn)足噬菌體制劑研發(fā)過(guò)程中大規(guī)模高效率的噬菌體篩選工作，亟需一種高通量的噬菌體篩選方案，在不降低篩出率的前提下，提高噬菌體分離液的利用效率，從而提高噬菌體的篩選通量。
本種處理方法，針對(duì)傳統(tǒng)方法中所存在的種種問(wèn)題，開(kāi)創(chuàng)了一種全新的思路。它與傳統(tǒng)方法相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)：
1.通過(guò)微球包被后凍干的方法可延長(zhǎng)目標(biāo)菌株的保存時(shí)間，一次處理后可大量?jī)?chǔ)存于-20℃的環(huán)境中，每次操作時(shí)直接取出后使用即可，大大簡(jiǎn)化了操作步驟，提高篩選效率；
2.通過(guò)微球包被后的目標(biāo)菌株，被固定于海藻酸鈣凝膠網(wǎng)絡(luò)中，可通過(guò)濃縮菌液的方法，提高微球中目標(biāo)菌株的濃度，從而提高單位空間中的細(xì)菌數(shù)量，增大細(xì)菌與噬菌體顆粒的接觸概率，提高篩出率；
3.通過(guò)本方法可針對(duì)同一批次的噬菌體分離原液，進(jìn)行多株目標(biāo)菌株的篩選，提高原液的利用率同時(shí)，還可以大大簡(jiǎn)化操作步驟；
4.經(jīng)富集處理后的微球后可再次經(jīng)冷凍干燥處理，增加富集后微球的保存時(shí)間，可將多批次富集后微球一起處理，簡(jiǎn)化操作同時(shí)提高效率。
綜上所述，可以說(shuō)本方法具備了多種優(yōu)點(diǎn)，特別適合于在本領(lǐng)域中推廣應(yīng)用，其市場(chǎng)前景十分廣闊。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心