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小鼠骨髓瘤SP2/0細(xì)胞培養(yǎng)傳代方法

來源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2021年05月27日 10:12  

  細(xì)胞信息表

 

細(xì)胞名稱        小鼠骨髓瘤SP2/0

 

種屬            小鼠

 

組織來源          骨髓

 

生長狀態(tài)          半貼壁生長

 

形態(tài)特征          上皮細(xì)胞樣

 

培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型:DMEM培養(yǎng)基

              FBS:10%

              抗生素:雙抗

              培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5%

 

傳代方法          收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài):

                  如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培

              養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

                  如果細(xì)胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

              傳代方法:

              1棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS1-2次。

              21ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸

              后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓

              后加*培養(yǎng)基終止消化。

              3一般沒有特殊說明,細(xì)胞一般是一傳二。

 

凍存方法          70%*培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,先用現(xiàn)配。

              儲(chǔ)存:液氮中長期保存。

 

            1觀察細(xì)胞最好在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

              2在運(yùn)輸過程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可

              離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

              3收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請于一周內(nèi)與我們

              聯(lián)系。

 

 

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

 

WB代做

HE染色

免疫熒光染色

蛋白相互作用分析

ELISA免費(fèi)代檢測

免疫組化

熒光定量PCR

番紅O固綠染色

流式細(xì)胞檢測

激光共聚焦

透射電鏡服務(wù)

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀(Co-IP

DNA甲基化

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA 測序

半定量RT-PCR

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

原位雜交(FIsh

石蠟/冰凍切片

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP

CCK8檢測

蛋白雙向(2-D)電泳

蛋白雙向2D-WB

ATP/ADP檢測

Taqman探針

細(xì)胞劃痕

基因組DNA提取

 

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