1)
對于哺乳動物細胞在自然的溫度生長最好,CO2 氣體維持在體內(nèi)pH 值,類似于在血液中二氧化碳CO2 濃度;高濕度能防止培養(yǎng)基的蒸發(fā);所有這些環(huán)境參數(shù)確保細胞正常表達蛋白質(zhì)。
適當?shù)呐囵B(yǎng)環(huán)境對于敏感的原代細胞和干細胞尤其重要。
但是每次打開二氧化碳培養(yǎng)箱的門時,培養(yǎng)箱內(nèi)的條件受到實驗室環(huán)境影響急劇變化。
一旦關(guān)上門,培養(yǎng)箱重新快速恢復(fù)設(shè)置參數(shù)。
細胞是否能長時間在設(shè)定條件下生長,取決打開培養(yǎng)箱門的時間和頻次,培養(yǎng)箱結(jié)構(gòu)和反饋調(diào)節(jié)系統(tǒng)。
2)
不同的結(jié)構(gòu)和反饋調(diào)節(jié)系統(tǒng)會導(dǎo)致*不同的恢復(fù)時間。結(jié)合雙溫探頭,二氧化碳傳感器和*超大增濕水庫,提供開門30 秒后 10 分鐘內(nèi)恢復(fù)所有參數(shù),這些已經(jīng)被客戶廣為認可。
但當二氧化碳培養(yǎng)箱結(jié)構(gòu)和反饋調(diào)節(jié)系統(tǒng)這些因素都非常完善了,我們還有哪些因素可以考慮。
CO2鋼瓶必須使用在優(yōu)質(zhì)二級的二氧化碳壓力閥。CO2培養(yǎng)箱輸入壓力必須保持在15±5psi (1 Bar),使CO2控制系統(tǒng)正常運作。簡單的單級調(diào)節(jié)無法保持這種壓力,這將導(dǎo)致二氧化碳的濃度控制不精準。
采用99.5%純度醫(yī)用級的CO2氣體內(nèi)雜質(zhì)少,可以減少對細胞產(chǎn)生負面影響。CO2氣體鋼瓶需備有二級的二氧化碳壓力閥,并設(shè)定到培養(yǎng)箱中的輸入壓力在15psi(1bar)。連接管道到空氣過濾器,然后到二氧化碳培養(yǎng)箱的背面標有鋸齒狀的接頭,一定要使用軟管夾,并檢查是否漏氣。當培養(yǎng)箱已正常運行24小時,用其他機構(gòu)校驗的溫度計校準溫度,并用二氧化碳測定儀或外部IR測量計檢查CO2濃度。
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