尺寸排阻色譜法是基于分子尺寸不同的分析物在化學(xué)惰性的多孔固定相的孔隙中保留作用的差異實(shí)現(xiàn)分離的一種色譜技術(shù)。
尺寸排阻法的分離特征:
1、樣品和填料不發(fā)生相互作用。
2、會(huì)否產(chǎn)生相互作用,取決于填料和樣品,以及流動(dòng)相和填料的疏水性平衡。
3、按照分子大小從大到小的順序被洗脫。
4、比填料的最大孔徑大的樣品無法被分析。這個(gè)界限稱為排阻限,表示色譜柱能分析的樣品的大小上限。
5、排阻限所對(duì)應(yīng)的色譜的洗脫容量被稱為填料粒子的外部容量。用符號(hào) Vo表示。
6、色譜柱中填料的所有微孔的容量稱為填料粒子的內(nèi)不容量。用符號(hào)Vi 表示。
尺寸排阻色譜柱為了方便根據(jù)待測(cè)成分的分子量來選擇合適的色譜柱,按照凝膠表面孔的大小分成了很多種類。各種色譜柱的排阻界限分子量在產(chǎn)品目錄上都有詳細(xì)記錄,使用的時(shí)候要按照待測(cè)樣品最大分子量不超過色譜柱的排除界限分子量的規(guī)則來進(jìn)行選擇。另外,在不超過排除界限分子量的前提下,盡量選擇排除界限分子量小的色譜柱比較合適。
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