培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì),其外文名稱為Medium。
培養(yǎng)基的成分:
1.無機(jī)營養(yǎng)物
無機(jī)營養(yǎng)物即無機(jī)鹽是植物生長發(fā)育所必需的,根據(jù)植物對(duì)無機(jī)鹽需要的多少,將其分為大量元素和微量元素。
2.有機(jī)營養(yǎng)成分
在配制培養(yǎng)基時(shí),不僅要加入無機(jī)營養(yǎng)成分,還要加入一定量的有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì),以利于培養(yǎng)物的生長和分化。一般常用糖類,維生素,肌醇(環(huán)己六醇),氨基酸和有機(jī)附加物。
3.植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)
在組培中,為了促進(jìn)培養(yǎng)物生長和器官分化,其培養(yǎng)基除加入營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須加入一種或多種植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)、生長調(diào)節(jié)物質(zhì)(植物激素)是培養(yǎng)基中的關(guān)鍵物質(zhì),在組培中起著決定的作用。一般常用生長素和細(xì)胞分裂素類。
4.瓊脂
依據(jù)態(tài)相不同,培養(yǎng)基分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基,其區(qū)別在于加入瓊脂與否,若加入瓊脂便形成膠體狀態(tài)的固體培養(yǎng)基,而不加則為液體培養(yǎng)基。
5.活性炭
在培養(yǎng)基中加入活性炭(AC),其目的主要是利用其吸附能力,減少一些有害物質(zhì)的不利影響,同時(shí)也創(chuàng)造暗環(huán)境,對(duì)某些植物誘導(dǎo)生根有利。
培養(yǎng)基的滅菌方法
高壓蒸汽滅菌:
高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛制備過程中混入各種雜菌,分裝后應(yīng)立即滅菌,至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時(shí)一般是在0.105MPa壓力下,溫度121℃時(shí),滅菌15~30min即可。消毒時(shí)間不宜過長,也不能超過規(guī)定的壓力范圍,否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類物質(zhì)就會(huì)在高溫下分解,失去營養(yǎng)作用,也會(huì)使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色,甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中,裝水量一般不超過瓶的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包扎封口,然后放入高壓鍋中滅菌后即為無菌水。滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3d,若無污染現(xiàn)象,則證明滅菌是*的,可以使用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基最好置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養(yǎng)基應(yīng)在1周內(nèi)用完,其他培養(yǎng)基最多也不要超過1個(gè)月。
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 品牌 | 包裝規(guī)格 |
SH30809.01/FB5846 | RPMI1640培養(yǎng)基(改良型) | LANSO | 500ml |
SH30023.01/FB8521 | DMEM/F12(1:1)培養(yǎng)基 | LANSO | 500ml |
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