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快速分析柱的制備和操作及主要構(gòu)造

來源:依利特(大連)分析儀器有限公司   2021年07月12日 11:44  
   快速分析柱通過離子調(diào)節(jié)分配層析技術(shù)分離混合物,這種技術(shù)是根據(jù)多種不同的化學(xué)特性分離分子。離子調(diào)節(jié)分配層析技術(shù)的分離機制包括離子排阻、離子交換、正相和反相分配、分子量排阻和配體交換。
  快速分析柱制備和操作快速柱色譜:
  1)確定干燥、不含溶劑的待分離混合物的重量。
  2)用薄層色譜選取溶劑體系,使Rf的值處于0.2~0.3之間,但如果混合物復(fù)雜,這可能不現(xiàn)實。在比較復(fù)雜的情況下,可能需要借助梯度洗脫的方式,簡單地說,就是在純化洗脫的過程中不斷提高溶劑的極性,該技術(shù)在后面有更加詳盡的介紹。但是在薄層色譜分析中,你必需確定哪種溶劑體系將會使不同的點樣處于Rf在0.2~0.3的范圍之內(nèi)。
  3)確定用于樣品上柱的方法。你可有三種選擇:凈試樣法,溶液法或硅膠吸附法。
  快速分析柱的構(gòu)造:
  由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。
  使用:
  色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。
  要求流動相具備以下的特點:
  流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。
  流動相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。
  流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
  流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。
  流動相沸點不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實驗無法進行。
  在流動相配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

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