名稱:SK-OV-3(人卵巢癌細胞)(通過STR鑒定)
別稱:SKOV-3 Skov3
種屬:人
年齡(性別):女;64歲
組織來源:卵巢腺癌,腹水轉移
生長特性:貼壁細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
背景描述:SK-OV-3細胞是由G·Trempe和L·J·Old于1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。SK-OV-3細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受。SK-OV-3細胞在裸鼠中致瘤,且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
生長培養(yǎng)基 McCoy's 5A+10% FBS(SERANA S-FBS-EU-015)+1% P/S
推薦傳代比例:1:2-1:4
推薦換液頻率:2-3次/周
倍增時間:~20-48 hours
SK-OV-3(人卵巢癌細胞)(通過STR鑒定)凍存條件
凍存液:50%基礎培養(yǎng)基+40%胎牛血清+10%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性:;Yes, in nude mice; forms moderately well differentiated adenocarcinoma consistent with ovarian primary.
抗原表達情況:Blood Type B; Rh+
基因表達情況:Blood Type B; Rh+
保藏機構:ATCC; HTB-77 ECACC; 91091004
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※正常情況下,融化后血清的外觀顏色應該是?
血清為動物來源,成分復雜,不同批次間會存在一些外觀上的差別。一般情況下,它們的顏色可能是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間。
※血清應如何保存?
未拆封的血清應存放于-15至-20℃,避免反復凍融。拆封后的血清應無菌分裝成一次的用量并存放于-15至-20℃,在產品質量證書標識的效期內均可使用。2-8℃溶解后建議盡快使用。
※血清的有效期是多久?
大部分胎牛血清效期是5年,針對每個批次,請通過質檢文件確定具體效期日期。
※血清應如何融解?
從冰箱中取出血清,放于2-8℃融化,融化過程中不時旋轉(swirling mix)混勻。充分融解后分裝或平衡到室溫后使用
※為什么有時血清中出現(xiàn)絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?
多種原因可能導致絮狀沉淀的形成,好常見的原因之一是融化過程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產品質量??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般好常用的是0.22um PES材質的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內一起過濾而不是直接過濾血清。
※為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?
在2-8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般好常用的是0.22um PES材質的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長時間放置。
※血清是否需要做滅活處理?
這取決于您的應用。
滅活過程中,會導致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。好常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,因為補體在機體中參與細胞殺傷,巨噬細胞和淋巴細胞活化,肥大細胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過程,所以一般在免疫學相關研究中及肌細胞和干細胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進行滅活處理。
※如何進行血清滅活處理?
血清請先按上述“血清應如何融解”中的操作步驟融化和混勻,熱滅活時請將血清置于56℃水浴30分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質的影響,一次滅活的血清體積不宜過大。好好準備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時將裝有血清和水的容器同時放入56℃水浴, 在裝水的容器中放置溫度計,加熱過程中不時輕輕旋轉混勻血清,當溫度計顯示達到56℃左右,開始計時。56 ℃水浴后,建議馬上轉移到冰上降溫。
※為什么需要對血清進行gamma射線輻照?
gamma 射線輻照的目的是滅活血清中的病毒,一般情況下,25-40kGy和30-45kGy是常用的輻射劑量。
※如何應對血清的批間差?
琛藝銷售的胎牛血清產品通過嚴格的質控盡可能縮小批間差,但由于血清本身的特點和來源,無法*避免批間差。客戶可以通過做預測試等方式,選擇可滿足要求的血清批次。
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