當我們運動時，骨骼會變得強壯。相反，如果缺乏運動，將會導(dǎo)致骨質(zhì)流失，增加骨折的風險。且隨著年齡的增長，人體骨骼對運動的反應(yīng)能力也會逐漸減弱，這導(dǎo)致老年人成為患骨質(zhì)疏松癥高危人群。

想要預(yù)防此類疾病，空閑時間多運動，讓骨骼變強壯起來。當我們運動時，所引起的機械負荷，刺激成骨細胞形成，增加骨質(zhì)強度。但引起這種刺激的機制尚不清楚，骨骼含有一種叫做骨細胞的細胞，骨細胞駐留在骨基質(zhì)中，感知機械負荷的變化，并產(chǎn)生信號改變成骨細胞的骨形成。

以此為基點，來自美國小石城阿肯色大學醫(yī)學系 、美國圣路易斯華盛頓大學 骨科外科 的研究團隊進行了相關(guān)研究，在 eLife期刊上發(fā)表了名為《Stimulation of Piezo1 by mechanical signals promotes bone anabolism. 》的研究論文。

實驗發(fā)現(xiàn)，Piezo1，一種機械感應(yīng)離子通道，在骨細胞中表達強烈，其表達的活性因流體剪切力而增加。此外，在成骨細胞和骨細胞中有條件缺失Piezo1會降低皮質(zhì)厚度和骨量。作者研究報道，離子通道Piezo1是流體剪切應(yīng)力誘導(dǎo)的骨細胞基因表達變化所必需的，而小分子激動劑對Piezo1的刺激足以復(fù)制流體流動對骨細胞的影響。

1.Piezo1 在骨細胞系中調(diào)解機械轉(zhuǎn)移。

為了識別骨細胞中響應(yīng)機械信號的鈣通道，實驗通過RNA-seq比較了骨細胞系MLO-Y4在靜態(tài)和流體剪切力條件下的基因表達譜。

實驗表明，靜態(tài)和流體剪切作用下，大量基因在MLO-Y4細胞中有差異表達。此外，通過RNA-seq(圖1A)和RT-qPCR(圖1B)檢測，MLO-Y4細胞中的流體流動也可以顯著上調(diào)Piezo1的表達。在MLO-Y4細胞中，Piezo1的表達量約為Piezo2的200倍(圖B)。在12周齡小鼠分離的骨細胞皮質(zhì)骨中，Piezo1的表達也遠高于Piezo2(圖C)。

因此，在MLO-Y4細胞中，敲除Piezo1可以顯著抑制液體流動引起的細胞內(nèi)鈣的增加(圖D)。敲除Piezo1還會減弱Ptgs2和Tnfrsf11b的流體流動刺激(圖E)。這些結(jié)果表明，Piezo1有助于MLO-Y4細胞對流體剪切應(yīng)力的反應(yīng)。

(A） MLO-Y4細胞中鈣通道的mRNA水平受流體剪切應(yīng)力的調(diào)節(jié)，由RNA-seq決定。(B)靜態(tài)或流體剪應(yīng)力條件下培養(yǎng)2小時MLO-Y4細胞中Piezo1和Piezo2 mRNA的qPCR。*p<0.05相對于靜態(tài)。（C）3個月大的野生類型C57BL/6J小鼠皮質(zhì)骨中Piezo1和Piezo2 mRNA水平  （D） 在液體流動開始前后，在控制或Piezo1擊倒MLO-Y4細胞時測量的細胞內(nèi)鈣濃度。箭頭表示流體流動開始的時間。（E）Piezo1、Ptgs2和Tnfrsf11b的 qPCR 控制或Piezo1擊倒 MLO-Y4 細胞，在靜態(tài)或流體剪切應(yīng)力條件下培養(yǎng)，每組 2 小時 n = 3。（F）括號中使用2-way ANOVA表示比較?；疑硎眷o態(tài)狀態(tài)，藍綠色表示流體剪應(yīng)力。

(A） 在治療 DMSO 或 10 μM Yoda1 后立即測量控制或Piezo1擊倒 MLO-Y4 細胞的細胞內(nèi)鈣濃度。（B、C） 用 Dmso 或 10 μm Yoda1 處理， 每組 2 小時 n = 3 。*p<0.05處理控制相同的基因型由雙向ANOVA。（D） Ptgs2、 Wnt1、 Tnfrsf11b、 Cyr61和Sost的 qpcr， 來自 5 周大的老鼠用 Dmso 或 10 μm Yoda1 治療的 5 周大小鼠的體外培養(yǎng)骨皮質(zhì)， 每組 4 小時 n = 3 。（E）在 C57BL/6J 小鼠的頭骨中，Wnt1的 qPCR 為每組 4 小時 n = 12 小時。（f） 體內(nèi)Yoda1管理的時間表。（g， h）皮質(zhì)厚度和取消在分離股骨（G）4個月大的Yoda1治療雌性C57BL/6J小鼠（n = 每組12）的腰椎（H）。（I） 在4個月大Yoda1治療雌性C57BL/6J小鼠的血清中循環(huán)骨鈣素水平（n = 每組12）。

為了確定Yoda1是否能夠增加體內(nèi)的骨量，我們使用Yoda1給4個月大的雌性WT C57BL/6J小鼠服用了2周時間。Yoda1沒有改變體重，但增加了股骨皮質(zhì)厚度和松質(zhì)骨量。Yoda1還增加了椎骨皮質(zhì)厚度。實驗結(jié)果表明，Yoda1對Piezo1激活模擬了流體剪切應(yīng)力對骨細胞的影響，并增加了小鼠的骨量。

(A） C57BL/6J 小鼠在 Yoda1停留 2 周前后體重 （n = 每組 12 只小鼠）。（B） ELISA在小鼠中測量的血清CTX，如（A）所述。

總之，實驗研究表明，Piezo1在維持骨穩(wěn)態(tài)中起著關(guān)鍵作用，并表明這是通過調(diào)節(jié)成骨細胞、骨細胞兩者的機械感應(yīng)來實現(xiàn)的。

研究發(fā)現(xiàn)，Piezo1的激活模擬了機械刺激對骨細胞的影響，并增加了小鼠骨量，為探索這一途徑作為骨質(zhì)疏松癥的治療奠定了基礎(chǔ)。

參考文獻：

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