国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>其他文章>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

Transwell小室共培養(yǎng)條件下內(nèi)皮細胞對成骨細胞增殖、凋亡的影響

來源:上海泉眾機電科技有限公司   2021年07月23日 11:53  
在科技快速發(fā)展的今天,我國醫(yī)療體系已得到健全發(fā)展。但是骨質(zhì)疏松治療和骨折修復仍然是一道醫(yī)學難題。骨質(zhì)疏松癥先有被稱為無聲的“殺手“,后有"靜悄悄的流行病",它和中風相似,喜歡無聲無息地侵襲著人們?,F(xiàn)階段如何促進和維持骨的生成成為了治療骨質(zhì)疏松的主要解決問題。

針對上述的問題,來自空軍軍醫(yī)大學航空航天醫(yī)學系航空航天醫(yī)學教育部重點實驗室的李高志課題組和其他課題組合作研究,共同探索了在共培養(yǎng)條件下,微血管內(nèi)皮細胞bEnd.3對成骨細胞MC3T3-E1增殖、凋亡的影響。文章題目為《Transwell小室共培養(yǎng)條件下微血管內(nèi)皮細胞對成骨細胞增殖、凋亡的影響》。

在最終的實驗證實了在Transwell小室共培養(yǎng)條件下,微血管內(nèi)皮細胞bEnd.3能夠顯著促進成骨細胞MC3T3-E1的增殖,并抑制其凋亡。為骨質(zhì)疏松和骨折修復的醫(yī)學研究提供了突破口。

在介紹實驗之前,我們先了解微血管內(nèi)皮細胞的基本功能,微血管內(nèi)皮細胞是內(nèi)襯于血管內(nèi)壁的一層細胞,它不僅是血管內(nèi)屏障的重要組成部分,而且在調(diào)節(jié)機體內(nèi)穩(wěn)定、維持正常生理的免疫功能方面起到重要的作用。

骨骼內(nèi)的微血管內(nèi)皮細胞還可以分泌細胞因子調(diào)節(jié)成骨細胞的功能和新骨形成。因此,對血管內(nèi)皮細胞與成骨細胞之間的調(diào)控具有重要的醫(yī)學價值。

細胞共培養(yǎng)指兩種或者多種細胞在一起條件下共同培養(yǎng)??筛媚M體內(nèi)環(huán)境,這種方法被廣泛運用于細胞之間相互調(diào)控的研究。


實驗結(jié)果


1.MC3T3-E1/bEnd.3細胞共培養(yǎng)體系的建立

取復蘇后3 ~ 6 代生長狀態(tài)良好的MC3T3-E1細胞,胰酶消化制成單細胞懸液,進行細胞計數(shù),將細胞密度調(diào)整至2×105/mL后將1 mL 細胞懸液均勻接種于6孔板。利用孔徑0.4 µm 的Transwell小室建立非接觸的細胞共培養(yǎng)系統(tǒng)。


取復蘇后3 ~ 6 代生長狀態(tài)良好的bEnd.3細胞,胰酶消化制成單細胞 懸 液 , 進 行 細 胞 計 數(shù) , 將 細 胞 密 度 調(diào) 整 至2×105/mL后 將 1 mL 細 胞 懸 液 均 勻 接 種 于Transwell小室內(nèi)底面。然后將接種有bEnd.3細胞的Transwell小室插入接種有MC3T3-E1細胞的6孔板中,建立MC3T3-E1和bEnd.3的1∶1比例的細胞共培養(yǎng)體系。

單獨培養(yǎng)的MC3T3-E1細胞,孔中不置入小室。兩者均使用共培養(yǎng)培養(yǎng)基(DMEM高糖培養(yǎng)基與α-MEM培養(yǎng)基混合,比例為1∶1,含10%胎牛血清和1%青霉素-鏈霉素溶液),置于37℃孵箱中,保持5% CO2 濃度,每2 d換液1次。

2.實驗分組
對照組:單獨培養(yǎng)MC3T3-E1細胞;共培養(yǎng)組:MC3T3-E1細胞+ bEnd.3 細胞,實驗重復3次。

實驗結(jié)論


1、共培養(yǎng)條件下微血管內(nèi)皮細胞促進成骨細胞的增殖。

在共培養(yǎng) 0 h、24 h、48 h、72 h 的4個時間點,對兩組MC3T3-E1細胞樣本進行CCK-8檢測(圖1)。從生長曲線可以看出,對照組和共培養(yǎng)組 MC3T3-E1 細胞的細胞活性均隨著時間延長而增加,但共培養(yǎng)組 MC3T3-E1 細胞的細胞活性增加更明顯,并且在共培養(yǎng) 48 h 和 72 h 兩個時間點兩組差異有統(tǒng)計學意義 (P < 0.05)。


PI 單染流式細胞術(shù)的檢測結(jié)果表明 ,與 bEnd.3 共培養(yǎng)之后,MC3T3-E1 細胞周期中 3 個時期的比例出現(xiàn)顯著變化。


Western blotting 的結(jié)果證實 ,與 bEnd.3 共培養(yǎng)之后,MC3T3-E1 細胞的 PCNA 蛋白表達水平顯著升高 (P < 0.01),表明 MC3T3-E1細胞的增殖能力較對照組顯著增強。


2、共培養(yǎng)條件下微血管內(nèi)皮細胞抑制成骨細胞的凋亡 。

Annexin V-FITC/PI 雙染流式細胞檢測結(jié)果表明 (圖 4),與bEnd.3 共培養(yǎng)之后,MC3T3-E1細胞的凋亡率顯著下降 (P < 0.05)。


與 bEnd.3 共培養(yǎng)之后,MC3T3-E1細胞的凋亡率顯著下降 (P < 0.05)。采用 Westernblotting 檢測凋亡相關(guān)因子 Bax、Cleaved Caspase-3的表達變化 ,結(jié)果顯示,與對照組相比,共培養(yǎng)組 MC3T3-E1 細胞 Bax、Cleaved Caspase-3 的表達水平顯著降低 (P<0.05)。


上述結(jié)果顯示,在Transwell 共培養(yǎng)條件下,bEnd.3 能夠抑制 MC3T3-E1 細胞的凋亡。


本 研 究 利 用 Transwell 小 室 , 構(gòu) 建 bEnd.3/MC3T3-E1 共培養(yǎng)體系。研究表明,在 Transwell 小室共培養(yǎng)條件下,微血管內(nèi)皮細胞 bEnd.3 能夠顯著促進成骨細胞MC3T3-E1 的增殖,并抑制其凋亡。這為防治骨質(zhì)疏松、構(gòu)建血管化組織工程骨選擇合適的微血管內(nèi)皮細胞提供了理論依據(jù),并進一步加深了微血管內(nèi)皮細胞對成骨細胞功能調(diào)控的理解。



參考文獻:[1]李高志,張麗君,王藝璇,徐麗群,胡澤兵,石菲,張舒,曹新生.Transwell小室共培養(yǎng)條件下微血管內(nèi)皮細胞對成骨細胞增殖、凋亡的影響[J].


小編旨在分享、學習、交流生物科學等領(lǐng)域的研究進展。如有侵權(quán)或引文不當請聯(lián)系小編修正。微信搜索公眾號“Naturethink”,學習更多關(guān)于細胞共培養(yǎng)相關(guān)知識吧!




免責聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
道孚县| 阿巴嘎旗| 永德县| 蓬安县| 长子县| 偏关县| 轮台县| 嵊州市| 贺州市| 邯郸县| 体育| 自治县| 阳新县| 景宁| 三台县| 平陆县| 济源市| 聂荣县| 高雄市| 柳林县| 尉氏县| 新丰县| 台南市| 城步| 石泉县| 锦州市| 东宁县| 临泉县| 丽水市| 九江市| 九台市| 彩票| 油尖旺区| 略阳县| 仁化县| 潜江市| 泌阳县| 宁蒗| 安庆市| 临夏县| 泗水县|