PI 單染流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)結(jié)果表明 ，與 bEnd.3 共培養(yǎng)之后，MC3T3-E1 細(xì)胞周期中 3 個(gè)時(shí)期的比例出現(xiàn)顯著變化。

Western blotting 的結(jié)果證實(shí) ，與 bEnd.3 共培養(yǎng)之后，MC3T3-E1 細(xì)胞的 PCNA 蛋白表達(dá)水平顯著升高 (P < 0.01)，表明 MC3T3-E1細(xì)胞的增殖能力較對(duì)照組顯著增強(qiáng)。

2、共培養(yǎng)條件下微血管內(nèi)皮細(xì)胞抑制成骨細(xì)胞的凋亡 。

Annexin V-FITC/PI 雙染流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明 (圖 4)，與bEnd.3 共培養(yǎng)之后，MC3T3-E1細(xì)胞的凋亡率顯著下降 (P < 0.05)。

與 bEnd.3 共培養(yǎng)之后，MC3T3-E1細(xì)胞的凋亡率顯著下降 (P < 0.05)。采用 Westernblotting 檢測(cè)凋亡相關(guān)因子 Bax、Cleaved Caspase-3的表達(dá)變化 ，結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，共培養(yǎng)組 MC3T3-E1 細(xì)胞 Bax、Cleaved Caspase-3 的表達(dá)水平顯著降低 (P<0.05)。

上述結(jié)果顯示，在Transwell 共培養(yǎng)條件下，bEnd.3 能夠抑制 MC3T3-E1 細(xì)胞的凋亡。

本 研 究 利 用 Transwell 小 室 ， 構(gòu) 建 bEnd.3/MC3T3-E1 共培養(yǎng)體系。研究表明，在 Transwell 小室共培養(yǎng)條件下，微血管內(nèi)皮細(xì)胞 bEnd.3 能夠顯著促進(jìn)成骨細(xì)胞MC3T3-E1 的增殖，并抑制其凋亡。這為防治骨質(zhì)疏松、構(gòu)建血管化組織工程骨選擇合適的微血管內(nèi)皮細(xì)胞提供了理論依據(jù)，并進(jìn)一步加深了微血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)成骨細(xì)胞功能調(diào)控的理解。