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精品推薦 | 快速、高產(chǎn)的RNA體外合成方法

來(lái)源：翌圣生物科技（上海）股份有限公司 2021年07月31日 14:26

利用RNA體外合成（IVT）技術(shù)制備的mRNA疫苗在傳染病的防治上產(chǎn)生了巨大的影響，無(wú)論是其開發(fā)生產(chǎn)周期以及疫苗的安全、高效性都明顯優(yōu)于傳統(tǒng)疫苗，因此具有極大的發(fā)展?jié)摿?/span>。

▲ 圖1.疫苗接種圖（攝圖網(wǎng)）

mRNA疫苗主要是體外合成RNA，是以DNA為模板通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄得到，常用的是以線性化質(zhì)粒DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物為模板利用RNA聚合酶在體外轉(zhuǎn)錄合成再進(jìn)行修飾獲得。是利用含有T7啟動(dòng)子（TAATACGACTCACTATAGGG）或SP6啟動(dòng)子（ATTTAGGTGACACTATAG）序列的DNA為模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的條件下，以NTP為底物合成與模板DNA中一條鏈互補(bǔ)的mRNA，簡(jiǎn)單快速獲得大量的mRNA分子，通過(guò)在5’端加上帽子結(jié)構(gòu)和3’端加ployA尾加強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性。

▲ 圖2.體外轉(zhuǎn)錄（IVT）mRNA生產(chǎn)和裝配過(guò)程^[1]

體外合成RNA應(yīng)用方向

RNA結(jié)構(gòu)與功能研究

RNAi研究

探針雜交應(yīng)用

mRNA疫苗、藥物開發(fā)

顯微注射

體外合成RNA常見問(wèn)題和困惑

如何獲得所需的轉(zhuǎn)錄模板？

為什么自己配置反應(yīng)體系無(wú)論如何優(yōu)化都無(wú)法獲得足夠高的產(chǎn)率？

有沒(méi)有一款包含全套反應(yīng)試劑的Kit，讓我不再為體系配置而煩惱？

有沒(méi)有一款性價(jià)比高T7 Kit，讓費(fèi)用問(wèn)題不再是我科研和生產(chǎn)路上的攔路虎？

有沒(méi)有一款試劑盒適用于多種類型RNA的合成？

......

翌圣生物開發(fā)出的高性價(jià)比的T7高產(chǎn)量體外合成試劑盒包含一整套的RNA合成所需試劑，并配有詳細(xì)的教程。本試劑盒可以合成長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄本以及短轉(zhuǎn)錄本，以1μg的模板投入量可以產(chǎn)生100-200 μg的RNA，適用于單鏈 RNA合成和以Cap analog為引物合成Capped mRNA。

T7Kit測(cè)試數(shù)據(jù)

高濃度的RNA是后續(xù)開發(fā)RNA相關(guān)高產(chǎn)量產(chǎn)品的關(guān)鍵所在，因此加入高濃度的RNA才能達(dá)到產(chǎn)品高產(chǎn)的效果。翌圣開發(fā)出的Hifair^®T7 High Yield RNA Synthesis Kit以1μg的模板投入量可以產(chǎn)生100-200 μg的RNA，可以*要求。

▲ 圖3.不同目的片段的轉(zhuǎn)錄后電泳圖

▲ 圖4.不同目的片段的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量

在影響RNA相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量成敗的關(guān)鍵因素中，合成的RNA的品質(zhì)也是關(guān)鍵一環(huán)。因?yàn)楹铣傻腞NA的純度（即品質(zhì)）不好，對(duì)產(chǎn)品的產(chǎn)率會(huì)產(chǎn)生很大影響。翌圣Hifair^®T7 High Yield RNA Synthesis Kit所合成的RNA經(jīng)過(guò)安捷倫2100測(cè)定，其純度單一，說(shuō)明合成后的RNA品質(zhì)純度高，對(duì)產(chǎn)品的產(chǎn)率會(huì)有很大提升。

<不同長(zhǎng)度rna轉(zhuǎn)錄>

（安捷倫2100）

▲ 圖5&圖6.不同長(zhǎng)度RNA轉(zhuǎn)錄及品質(zhì)測(cè)試

翌圣生物提供您簡(jiǎn)便、高品質(zhì)、高性價(jià)比的T7合成試劑盒以及相關(guān)對(duì)應(yīng)產(chǎn)品，助力您的科學(xué)研究和藥物及疫苗的開發(fā)，共同為人類的未來(lái)健康事業(yè)奉獻(xiàn)一份力量。

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產(chǎn)品名稱	貨號(hào)	規(guī)格
Hifair®T7 High Yield RNA Synthesis Kit	10623ES50/60	50/100 T

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NTP Set Solution(ATP,CTP,UTP,GTP,100 mM each）
10133ES03
1 Set (4 vial)

參考文獻(xiàn)

【1】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tailoring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response,Trends in Molecular Medicine,Volume 26, Issue 3,2020,Pages 311-323,

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