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Hifair®系列逆轉(zhuǎn)錄酶是在M-MLV Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上改造的逆轉(zhuǎn)錄酶，其熱穩(wěn)定性大幅度提高，可耐受60℃的反應(yīng)溫度，適合具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時， Hifair®系列逆轉(zhuǎn)錄酶缺失了RNaseH活性，提高了其延伸能力，最長可合成19.8 kb的cDNA。此外，該酶增強了與模板的親和力，非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。
產(chǎn)品選擇指南
產(chǎn)品形式 | 產(chǎn)品名稱 | 引物 | 適用實驗類型 | 產(chǎn)品特點 |
單酶 | Hifair® II Reverse Transcriptase /11110ES | 無 | PCR/qPCR | A. 逆轉(zhuǎn)錄條件：42℃,30 min |
Hifair® III Reverse Transcriptase/11111ES | B. 逆轉(zhuǎn)錄條件：55℃,15 min 總RNA使用范圍：10 pg-5 μg 合成cDNA長度：19.8 kb | |||
酶和buffer 分開 | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit/11119ES/11121ES | 單獨成管的 | PCR/qPCR | 同A |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit/11139ES | 同B | |||
酶和buffer預(yù)混 | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR/11120ES/11123ES | 按比例預(yù)混的 | qPCR | C. 逆轉(zhuǎn)錄條件：42℃,30 min 總RNA使用范圍：1 ng-5 μg 2×預(yù)混液 |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR/11141ES | D. 逆轉(zhuǎn)錄條件：55℃,15 min 總RNA使用范圍：10 pg-5 μg 4×預(yù)混液，可投入更大體積模板 |
產(chǎn)品性能
可耐受60℃反應(yīng)溫度，適合具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄
圖1. 以500 ng 293T細胞的總RNA為模板, 使用11139ES在42℃-65℃下進行逆轉(zhuǎn)錄。取1 μL cDNA為模板, 使用Hieff® Canace Gold 高保真酶 (Cat 10148ES)擴增TFRC基因（4.4 kb）。M:1 kb DNA ladder.
*的延伸性能，可合成19.8 kb的cDNA
圖2. 以500 ng 293T細胞的總RNA為模板，oligodT為引物，使用11139ES合成cDNA。 取1 μL cDNA為模板，使用Hieff® Canace Gold 高保真酶(Cat 10148ES)擴增DY1C1N1基因（19.9 kb）的5’的500 bp。M: 1 kb DNA ladder.
出色的逆轉(zhuǎn)錄效率，適合不同 GC 含量、不同表達豐度的基因
圖3. 以300 ng 293T細胞的總RNA為模板, 使用11141ES、T品牌合成cDNA。取1 μL cDNA為模板, 使用Hieff UNICON® Power qPCR 預(yù)混液 (Cat
.11195ES)擴增20個不同GC含量（25-65%）、不同表達豐度的基因。
線性檢測范圍廣，Total RNA 10 pg-5 μg
圖4. 以10 pg-5 μg的293T細胞的總RNA為模板，使用11141ES合成cDNA。取1 μL cDNA為模板，使用Hieff UNICON® Power qPCR 預(yù)混液 (Cat .11195ES)擴增PTTG1基因。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品定位 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
單酶 | Hifair® II Reverse Transcriptase | 11110ES92/93 |
高靈敏度單酶 | Hifair® III Reverse Transcriptase | 11111ES92/93 |
Kit | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit | 11119ES60 |
Kit(含gDNA去除步驟) | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) | 11121ES60 |
高靈敏Kit（含gDNA去除步驟） | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) | 11139ES60 |
預(yù)混液 | Hifair® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix | 11120ES60 |
預(yù)混液（含gDNA去除步驟） | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11123ES60 |
高靈敏預(yù)混液（含gDNA去除步驟） | Hifair® III1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11141ES60 |
YEASEN逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品已發(fā)表文獻（部分）
[1] Liu C X, Li X, Nan F, et al. Structure and degradation of circular RNAs regulate PKR activation in innate immunity[J]. Cell, 2019, 177(4): 865-880. e21.（IF31.398）
[2] Fan H, Hong B, Luo Y, et al. The effect of whey protein on viral infection and replication of SARS-CoV-2 and pangolin coronavirus in vitro[J]. Signal transduction and targeted therapy, 2020, 5(1): 1-3. (IF13.493)
[3] Wang J., et al., The mycobacterial phosphatase PtpA regulates the expression of host genes and promotes cell proliferation[J]. Nat Commun. 2017 Aug 15;8(1):244.（IF 12.353）
[4] Zhou L, Hou B, Wang D, et al. Engineering Polymeric Prodrug Nanoplatform for Vaccinatio Immunotherapy of Cancer[J]. Nano Letters, 2020.（IF12.279）
[5] Xu L, Xu S, Sun L, et al. Synergistic action of the gut microbiota in environmental RNA interference in a leaf beetle[J]. Microbiome, 2021, 9(1). (IF 11.607)
HB210926
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