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UCF·ME® UltraNuclease

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2021年08月02日 14:58  

什么是UCF·ME® UltraNuclease

UltraNuclease,全能核酸酶,又稱為廣譜核酸酶、非限制性核酸內(nèi)切酶。能夠在多種實驗條件下切割和降解各種形式的DNARNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。

UltraNuclease 生產(chǎn)全程均在GMP生產(chǎn)車間完成,質(zhì)檢方法均嚴(yán)格按照藥典中的方法進(jìn)行。該酶無蛋白酶活性、不含內(nèi)毒素和任何病毒污染物,適用于各種應(yīng)用場景,可適用于各種生物制品工業(yè)生產(chǎn)過程中殘留核酸的去除。

廣闊的應(yīng)用前景

1、降低細(xì)胞/細(xì)菌裂解時核酸釋放產(chǎn)生的黏度,并且適用于任何裂解方式。

2、在大規(guī)模的層析純化時,避免由于大量的核酸吸附在層析介質(zhì)上降低蛋白質(zhì)的有效載量從而降低純化得率。

3、在 ELISA、二維電泳和免疫印跡分析中,提高分辨率和回收率。

4、消除重組蛋白、疫苗等生物制品的外源性核酸殘留。

產(chǎn)品特性

1、酶的比活≥1.5×10U/mg(通用底物絕對定量法)

酶活*37℃,pH 8.0反應(yīng)條件,2.625 mL反應(yīng)體系中,在30 min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0(相當(dāng)于*消化37 μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個活性單位(U

2、酶的純度≥99%HPLC

3、不同反應(yīng)條件對酶活的影響(部分?jǐn)?shù)據(jù))

為了探索UltraNuclease最合適的操作條件,我們研究了在多種緩沖體系下對酶活性的影響以下僅展示部分?jǐn)?shù)據(jù),如需完整數(shù)據(jù),請聯(lián)系我們。

4、儲存及凍融穩(wěn)定性

-20℃、4℃儲存一個月,酶活幾乎無變化,37℃儲存一個月,酶活降低約30%

-80℃~25℃反復(fù)凍融10次,酶活性不受影響。

5、質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)符合GMP生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)

檢測項目

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

檢測方法

酶活

250-300 U/uL

通用底物法

比活

≥1.5×10U/mg

通用底物法

蛋白純度

≥99%

SDS-PAGE

蛋白酶

符合要求

通用底物法

細(xì)菌內(nèi)毒素

符合要求

凝膠法

宿主蛋白

陰性

ELISA

宿主DNA

陰性

qPCR

無菌檢測

無菌生長

通則1101

病原體檢測

陰性(不得檢出)

參照內(nèi)部方法

支原體檢測

陰性(不得檢出)

參照內(nèi)部方法

重金屬檢測

符合要求

通則0821


UltraNuclease ELISA kit (全能核酸酶檢測ELISA kit)

在正常的純化步驟中,全能核酸酶作為雜質(zhì)很容易被去除。為了檢測全能核酸酶的殘留,翌圣研發(fā)了配套的UltraNuclease ELISA kit,能夠準(zhǔn)確檢測樣本中全能核酸酶的殘留量,該試劑盒在線性、重復(fù)性、回收率及特異性等方面均表現(xiàn)優(yōu)異。


1、線性范圍:0.047~3 ng/mL,R20.99










2、批次間重復(fù)性好

在樣本中加入固定濃度的UltraNuclease,用3個不同批次的ELISA試劑盒進(jìn)行檢測,在核酸酶濃度3~0.186 ng/mL之間,檢測回收率均在70%~110%之間,CV10%。

3、模擬樣本回收率

對于不同濃度UltraNuclease核酸酶樣本回收率均在70%~130%之間,且優(yōu)于其他品牌。

4、特異性強(qiáng)

我們評估了全能核酸酶抗體與8種常見樣本的非特異性結(jié)合,干擾組與對照組結(jié)果重合,未見干擾。

表示與陰性相比有顯著性差異;NS:表示與陰性結(jié)果無顯著差異

常見問題FAQ

1、在哪一步中加入 UltraNuclease?

這取決于您處理的樣本。在病毒純化時,一般在病毒澄清后加入;大腸桿菌蛋白純化時,可以在菌體裂解時就加入;在處理細(xì)胞結(jié)團(tuán)問題時,可以直接加入培養(yǎng)基中與細(xì)胞共培養(yǎng)。

2、如果反應(yīng)溫度無法達(dá)到37℃,該如何使用?

UltraNuclease的酶活性受到溫度、處理時間、酶活單位的影響,如果溫度無法達(dá)到37℃,可以適當(dāng)添加酶的用量,或者延長孵育時間。

3、UltraNuclease是否與蛋白酶抑制劑兼容?

可以兼容,但需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTAEDTA 開始高于1mM時,EDTA將抑制部分核酸酶的活性。

4、如何去除 UltraNuclease

可通過 TFF、透析及色譜柱等方法將其去除。

5UltraNuclease ELISA kit可否用于其他品牌全能核酸酶殘留的檢測?

我們不建議這樣做。ELISA kit *是基于UltraNuclease開發(fā),能夠?qū)?/span>UltraNuclease進(jìn)行準(zhǔn)確定量。其他品牌的全能核酸酶在序列、生產(chǎn)工藝等方面可能與UltraNuclease有所不同,檢測結(jié)果可能不準(zhǔn)確。

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

UCF.ME® UltraNuclease GMP-grade

全能核酸酶

20157ES25/60/80/90

25KU/100 KU/1MU/5MU

UltraNuclease ELISA kit

36701ES59

96T



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