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如何避免以及處理PCR實驗室污染?

來源:濟南來寶醫(yī)療器械有限公司   2021年08月16日 16:13  

PCR檢測因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應用,不過正是由于它靈敏度*,極微量的污染源都有可能導致檢測結(jié)果的假陽性,因此,如何避免以及處理實驗室污染,對PCR人來說是一門必修課。

 

消除污染的操作步驟

 

1.物料準備

(1)購買噴壺(能夠噴出霧狀水汽的即可);

(2)購買市面上有效氯消毒片,根據(jù)要求配制不同濃度的消毒液,或者購買成品次氯酸鈉消毒液配制合適濃度消毒水;

(3)購買核酸氣溶膠污染清除劑(DNA AWAY®原液/MediClean®稀釋100倍);

(4)無紡布/無塵紙等。

 

2.處理方法

(1)清理廢液缸并且對廢液缸用有效氯含量為2000mg/L消毒水浸泡消除核酸污染;

(2)用有效氯含量為2000mg/L消毒水對移液槍進行擦洗,關(guān)鍵部位為移液槍前端易污染部位,清潔干凈后用潔凈水再擦拭一遍;

(3)將離心管架、擴增管架、擴增管架底板、吸嘴盒及其他相關(guān)物品用有效氯含量為500mg/L的消毒水浸泡2小時后,用清水沖洗干凈晾干后使用;

(4)對污染區(qū)域內(nèi)的設(shè)備如擴增儀、全自動提取儀等,使用核酸氣溶膠污染清除劑進行反復處理;對生物安全柜等含有空氣過濾系統(tǒng)的設(shè)備,需更換過濾網(wǎng);

(5)用有效氯含量為500mg/L的消毒液對整個實驗室(地板、墻面、天花板、門、窗戶等地方)進行清潔,并且用用有效氯含量為1000mg/L的消毒水對實驗室進行噴霧消毒(重點部位為操作區(qū)),有效降解空氣中的氣溶膠與附著在實驗臺表面的核酸污染;同時加大通風量(內(nèi)循環(huán)無用,盡可能外循環(huán));

(6)待污染區(qū)域及設(shè)備器件清理完成后,常用設(shè)備和操作臺面使用移動紫外消毒車近距離輻照1小時;實驗室內(nèi)則使用室內(nèi)紫外燈整晚輻照。

步驟(1)-(6)必須堅持每天進行,確保消除實驗室污染;

 

3.污染消除判斷標準

設(shè)計陰性對照組,根據(jù)陰性對照確認污染情況??墒褂贸ㄩ_后隔夜放置操作區(qū)的陰性對照進行實驗(在單獨的實驗室驗證),若連續(xù)三天陰性對照沒有起跳,則說明污染得到控制,可恢復正常實驗。

 

當然,為降低可能出現(xiàn)的PCR污染或杜絕污染的出現(xiàn),在實驗室前期設(shè)計及日常實驗室管理和操作中,就需要進行合理的規(guī)劃以及嚴格執(zhí)行實驗室SOP,把污染的可能性扼殺在搖籃中。

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