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茶葉中黃曲霉毒素檢測方案

來源:青島普瑞邦生物工程有限公司   2021年08月17日 14:19  

針對(duì)茶葉復(fù)雜基質(zhì),參考【GB 5009.22-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定】,建議實(shí)驗(yàn)過程如下:

1檢測方法

1.1 第一法(液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法)

黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:AFB1AFB2AFG1AFG210.310.3ug/mL

黃曲霉毒素混合同位素內(nèi)標(biāo)工作液:AFB1AFB2AFG1AFG20.5 ug/mL

稱取 5g試樣(根據(jù)樣品吸水性可調(diào)整)+50uL混合標(biāo)準(zhǔn)工作液+40uL混合同位素內(nèi)標(biāo)工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min離心 10min(離心速度 4000r/min取上清液4mLPriboFast®MFC160/260固相凈化柱2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱先用10mLPBS淋洗,再用10mL水淋洗免疫親和柱棄去淋洗液,使空氣進(jìn)入柱子,將水?dāng)D出柱子2mL甲醇洗脫,收集洗脫液于試管中50℃下氮?dú)獯抵两?,?/span>0.5mL流動(dòng)相復(fù)容微孔濾膜(0.22μm)濾過,取續(xù)濾液上機(jī)。

 

1.2 第二法(液相色譜法)

黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:AFB1AFB2AFG1AFG210.310.3 ug/mL

稱取 5g試樣+50uL混合標(biāo)準(zhǔn)工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min離心 10min(離心速度 4000r/min取上清液4mLPriboFast®MFC160/260固相凈化柱2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱先用10mLPBS淋洗,再用10mL水淋洗免疫親和柱棄去淋洗液,使空氣進(jìn)入柱子,將水?dāng)D出柱子2mL甲醇洗脫,收集洗脫液于試管中50℃下氮?dú)獯抵两桑?/span>0.5mL流動(dòng)相復(fù)容微孔濾膜(0.22μm)濾過,取續(xù)濾液上機(jī)。

 

樣品來源:檢測樣品庫中,選取紅茶、綠茶各一種有代表性的茶葉,分別做兩種方法的本底和加標(biāo)平行。


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