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天冬酰胺合成酶(AS)操作流程

來源:上海研生實業(yè)有限公司   2021年08月19日 15:43  

天冬酰胺合成酶(AS)操作流程:

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


試劑使用須知:

(1)請參照相關法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。

(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。

(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術人員。必須在專業(yè)人士的指導監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關法律法規(guī)正當處理。

(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。


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