牛垂體提取物(BPE)是由牛腦垂體制備的提取物,有研究表明BPE具有明顯改善人垂體腺瘤細胞體外無血清培養(yǎng)條件的作用,對離體培養(yǎng)的垂體腺瘤細胞增殖具有促進作用。常用作無血清細胞培養(yǎng)的生長補充劑,可促進上皮細胞、內(nèi)皮細胞和黑色素細胞增殖,廣泛用作各種上皮細胞和黑色素細胞培養(yǎng)中的補充劑。此外,其具有抗氧化能力,可對抗過氧化氫誘導(dǎo)的細胞壞死,蛋白質(zhì)氧化,膜破碎和DNA損傷。
BPE是無血清的促有絲分裂添加劑,含有天然生長因子的*混合物,可與MCDB系列(MCDB170或MSDB154)或DMEM/Ham'sF12的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組合使用。
對于單層中上皮細胞的生長,推薦濃度為35?70ug/mlBPE。通過使用優(yōu)化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基如MCDB170或MCDB154,濃度可以降低。確定最佳BPE濃度的*方法是在選擇的細胞上進行簡單的生長測定。建議將產(chǎn)品分裝成單次使用體積,以避免反復(fù)凍融所引起的可能活性損失。
牛腦垂體提取物的提取方法,獲取新鮮牛腦垂體,去除組織表面血污及雜物,并剔除外部粘連組織及白色包膜,裸露整個垂體組織;向垂體組織中加入蛋白酶抑制劑,并破碎為糊狀,然后再加入蛋白提取液,在0~4℃低溫條件下依次經(jīng)過攪拌,離心,收集上清液;最后將上清液滅菌,即得所述牛腦垂體提取物。采用本發(fā)明方法提取的牛腦垂體提取物中蛋白含量平均可達到15mg/ml以上,既可以用于細胞培養(yǎng),也可以用于組織工程培養(yǎng)。
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