影響培養(yǎng)基*滅菌的因素很多,除了培養(yǎng)基中雜菌的種類和數(shù)量、滅菌溫度和時(shí)間長度外,還取決于:
1.營養(yǎng)的維持。
濕熱滅菌殺死微生物的同時(shí),培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也受到一定程度的破壞,尤其是氨基酸和維生素。比如在121℃下僅20分鐘,賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸就有59%被破壞,還有相當(dāng)數(shù)量的蛋氨酸、色氨酸也被破壞。在熱量的作用下,一些營養(yǎng)物質(zhì)可能會(huì)因熱量而相互反應(yīng),導(dǎo)致培養(yǎng)基中原有的營養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生變化,從而影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。
2.微生物的耐熱性。
細(xì)菌孢子耐熱性高,滅菌所需時(shí)間取決于將細(xì)菌孢子減少到規(guī)定數(shù)量所需的時(shí)間。
3.pH值。
pH值對(duì)微生物的耐熱性影響很大。當(dāng)pH值在6.0-8.0之間時(shí),微生物死亡的可能性極小。pH<6.0時(shí),微生物容易死亡,H+容易滲入微生物細(xì)胞,從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng),促進(jìn)其死亡。因此,培養(yǎng)基的pH值越低,所需時(shí)間越短。
4.培養(yǎng)基的組成。
由油、糖、蛋白質(zhì)組成的高濃度有機(jī)物會(huì)在細(xì)胞周圍形成一層薄膜,影響熱傳導(dǎo)。然而,鹽和色素的高濃度削弱了其耐熱性,使殺菌更容易。例如,大腸桿菌在水中加熱至60-65℃時(shí)死亡,在10%糖溶液中在70℃加熱4-6分鐘,在30%糖溶液中加熱30分鐘。一般含糖量高的時(shí)候,11111111選擇115C30分鐘;一般培養(yǎng)基可選擇121℃培養(yǎng)20分鐘。
5.泡沫。
泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲入,殺死雜菌。
6.顆粒。
小顆粒容易殺菌,大顆粒難殺菌。含有少量較大顆粒和粗纖維的介質(zhì)可通過粗過濾去除(這不應(yīng)影響介質(zhì)質(zhì)量)。培養(yǎng)基結(jié)塊會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基滅菌不*。
7.滅菌鍋內(nèi)空氣是否排出。
這是影響殺菌的關(guān)鍵點(diǎn),也就是溫度和壓力的比例關(guān)系。同樣的壓力下,如果空氣沒有排出,也就是說沒有用純蒸汽滅菌,此時(shí)的溫度可能達(dá)不到目的要求,會(huì)嚴(yán)重影響滅菌效果。
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