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COLO205-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 .

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2021年09月02日 10:30  

產(chǎn)品A名稱:COLO205-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記細(xì)胞 已通過STR鑒定

中文名稱:COLO205-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

規(guī)格:T25

形態(tài)特征:

生長狀態(tài):成纖維細(xì)胞樣

特征特性:貼壁生長

培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS(推薦BI優(yōu)等胎牛血清貨號:04-001-1acs

傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

凍存條件無血清凍存液規(guī)格:100ML

支原體檢測:陰性

使用權(quán)限:A

參考文獻:

供應(yīng)商:上海琛藝實業(yè)有限公司

復(fù)蘇周期:10個工作日左右

 

培養(yǎng)步驟:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

 

1、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

2、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

 

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

 

上海琛藝是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司,擁有獨立細(xì)胞房(可隨時約定參觀),供應(yīng)胎牛血清,STR鑒定細(xì)胞,感受態(tài)細(xì)胞等,專業(yè),專注,性價比高,是您Shou選之家。

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