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改善液相色譜基線(xiàn)噪音的方法

來(lái)源:依利特(大連)分析儀器有限公司   2021年09月06日 13:47  
   液相色譜是為適應(yīng)出口而改進(jìn)的高性能高效液相色譜儀產(chǎn)品,儀器采購(gòu)高標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)口原裝部件,符合相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),性能穩(wěn)定可靠,面向全球銷(xiāo)售.液相色譜儀代表了zui新的液相色譜儀制造技術(shù)水平.產(chǎn)品已經(jīng)出口到美國(guó)、加拿大、日本、朝鮮、印度及非洲、東南亞國(guó)家等國(guó)際市場(chǎng),被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化工、食品、石化、環(huán)保、能源、冶金、航空航天等工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程和環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域.
  基線(xiàn)噪音是做液相的同學(xué)經(jīng)常感到頭疼的問(wèn)題,尤其是在做痕量分析的時(shí)候。今天,我們來(lái)分析下噪音的來(lái)源,以及如何減小和消除噪音。
  一.流動(dòng)相的在線(xiàn)混合
  流動(dòng)相在線(xiàn)混合是為了簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟,流動(dòng)相混合的不充分是基線(xiàn)噪音的一個(gè)重要來(lái)源。
  流動(dòng)相混合方式主要兩種:
  1.低壓混合:采取時(shí)間脈沖的方式,利用比例閥,將不同流動(dòng)相按一定比例混合。
  2.高壓混合:利用多個(gè)泵頭,控制每個(gè)泵的流量,來(lái)將流動(dòng)相按一定比例混合。
  從流動(dòng)相開(kāi)始混合在一起,到流動(dòng)相到達(dá)色譜柱頭,這一段體積叫做延遲體積(Delay Volume)?;旌掀黧w積越大,混合越好,但是相應(yīng)延遲體積就越大,會(huì)造成梯度的延遲。換句話(huà)說(shuō),就是流動(dòng)相的變化,需要一定時(shí)間后,才能真正到達(dá)色譜柱,對(duì)分離產(chǎn)生影響。這個(gè)現(xiàn)象在使用UPLC或者UHPLC的時(shí)候,會(huì)有比較明顯的作用。
  那如何減小因?yàn)榛旌隙斐傻幕€(xiàn)噪音呢?
  1.對(duì)于等度的方法:非常簡(jiǎn)單,預(yù)混流動(dòng)相就可以了。
  2.對(duì)于梯度的方法:部分預(yù)混流動(dòng)相也會(huì)幫助更好的混合,怎么做呢?看下面的例子。
  方法要求乙腈/水比例從10%走到85%。那可以將流動(dòng)相A配成10%的乙腈,流動(dòng)相B配成85%的乙腈,然后A/B梯度從0%走到100%。這就是部分預(yù)混。
  3.增大混合器的體積:一般混合器的體積從幾百u(mài)l到幾ml都有,在允許的延遲時(shí)間下,更換一個(gè)體積更大的混合器,能夠有效提高混合的效率。
  二.液相硬件問(wèn)題造成的基線(xiàn)噪音
  如果液相系統(tǒng)某些地方的工作不正常,也可能造成基線(xiàn)的噪音。
  1.系統(tǒng)有漏:特別是肉眼無(wú)法發(fā)現(xiàn)的微漏或者泵的內(nèi)漏,會(huì)造成流速的變化和混合比例的變化,從而導(dǎo)致基線(xiàn)噪音。
  檢查的方法就是對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行壓力測(cè)試:將系統(tǒng)從某個(gè)地方用死堵堵上,如泵出口,或者自動(dòng)進(jìn)樣器出口,將壓力升高到350bar后停泵,監(jiān)測(cè)壓力下降的情況。一般的標(biāo)準(zhǔn)是2-3bar/min的下降是正常水平?;蛘?5%/10min的下降。
  2.梯度比例問(wèn)題:可以對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行一個(gè)梯度測(cè)試,來(lái)檢查梯度混合是否準(zhǔn)確和一致。
  梯度測(cè)試
  a.將A配成0.1%的丙酮,B是水。
  b.在265nm的波長(zhǎng)下,將A的比例從10%,20%,30%這樣一個(gè)一個(gè)的升高,每個(gè)比例走3min。
  c.可以根據(jù)計(jì)算,看每個(gè)基線(xiàn)臺(tái)階上升是否準(zhǔn)確。
  d.也可以從0-100%走一個(gè)連續(xù)的梯度,看基線(xiàn)上升的平滑性和線(xiàn)性。
  三.流動(dòng)相脫氣不好造成的基線(xiàn)噪音
  對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣,不僅僅是為了防止系統(tǒng)里面氣泡的產(chǎn)生。流動(dòng)相脫氣越好,基線(xiàn)就會(huì)越好。
  如今zui常用的脫氣方式是在線(xiàn)脫氣機(jī),但是有的時(shí)候脫氣并不*。所以當(dāng)有基線(xiàn)噪音問(wèn)題時(shí),可以考慮采取多種脫氣方式。
  前面三點(diǎn)講的都是內(nèi)在原因造成的基線(xiàn)噪音或者波動(dòng)。如果你前面的原因都找過(guò)了,問(wèn)題還沒(méi)有解決,就得考慮一下是不是流動(dòng)相里面有雜質(zhì)或是電路噪音,我們下一節(jié)繼續(xù)講解。

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