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改善液相色譜基線噪音的方法

來源:依利特(大連)分析儀器有限公司   2021年09月06日 13:47  
   液相色譜是為適應出口而改進的高性能高效液相色譜儀產品,儀器采購高標準的進口原裝部件,符合相關國際標準,性能穩(wěn)定可靠,面向全球銷售.液相色譜儀代表了zui新的液相色譜儀制造技術水平.產品已經出口到美國、加拿大、日本、朝鮮、印度及非洲、東南亞國家等國際市場,被廣泛應用于醫(yī)藥、化工、食品、石化、環(huán)保、能源、冶金、航空航天等工業(yè)生產過程和環(huán)境監(jiān)測等領域.
  基線噪音是做液相的同學經常感到頭疼的問題,尤其是在做痕量分析的時候。今天,我們來分析下噪音的來源,以及如何減小和消除噪音。
  一.流動相的在線混合
  流動相在線混合是為了簡化實驗步驟,流動相混合的不充分是基線噪音的一個重要來源。
  流動相混合方式主要兩種:
  1.低壓混合:采取時間脈沖的方式,利用比例閥,將不同流動相按一定比例混合。
  2.高壓混合:利用多個泵頭,控制每個泵的流量,來將流動相按一定比例混合。
  從流動相開始混合在一起,到流動相到達色譜柱頭,這一段體積叫做延遲體積(Delay Volume)?;旌掀黧w積越大,混合越好,但是相應延遲體積就越大,會造成梯度的延遲。換句話說,就是流動相的變化,需要一定時間后,才能真正到達色譜柱,對分離產生影響。這個現(xiàn)象在使用UPLC或者UHPLC的時候,會有比較明顯的作用。
  那如何減小因為混合而造成的基線噪音呢?
  1.對于等度的方法:非常簡單,預混流動相就可以了。
  2.對于梯度的方法:部分預混流動相也會幫助更好的混合,怎么做呢?看下面的例子。
  方法要求乙腈/水比例從10%走到85%。那可以將流動相A配成10%的乙腈,流動相B配成85%的乙腈,然后A/B梯度從0%走到100%。這就是部分預混。
  3.增大混合器的體積:一般混合器的體積從幾百ul到幾ml都有,在允許的延遲時間下,更換一個體積更大的混合器,能夠有效提高混合的效率。
  二.液相硬件問題造成的基線噪音
  如果液相系統(tǒng)某些地方的工作不正常,也可能造成基線的噪音。
  1.系統(tǒng)有漏:特別是肉眼無法發(fā)現(xiàn)的微漏或者泵的內漏,會造成流速的變化和混合比例的變化,從而導致基線噪音。
  檢查的方法就是對系統(tǒng)進行壓力測試:將系統(tǒng)從某個地方用死堵堵上,如泵出口,或者自動進樣器出口,將壓力升高到350bar后停泵,監(jiān)測壓力下降的情況。一般的標準是2-3bar/min的下降是正常水平。或者15%/10min的下降。
  2.梯度比例問題:可以對系統(tǒng)進行一個梯度測試,來檢查梯度混合是否準確和一致。
  梯度測試
  a.將A配成0.1%的丙酮,B是水。
  b.在265nm的波長下,將A的比例從10%,20%,30%這樣一個一個的升高,每個比例走3min。
  c.可以根據(jù)計算,看每個基線臺階上升是否準確。
  d.也可以從0-100%走一個連續(xù)的梯度,看基線上升的平滑性和線性。
  三.流動相脫氣不好造成的基線噪音
  對流動相進行脫氣,不僅僅是為了防止系統(tǒng)里面氣泡的產生。流動相脫氣越好,基線就會越好。
  如今zui常用的脫氣方式是在線脫氣機,但是有的時候脫氣并不*。所以當有基線噪音問題時,可以考慮采取多種脫氣方式。
  前面三點講的都是內在原因造成的基線噪音或者波動。如果你前面的原因都找過了,問題還沒有解決,就得考慮一下是不是流動相里面有雜質或是電路噪音,我們下一節(jié)繼續(xù)講解。

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