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健竹科技成功研制出小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

來(lái)源:深圳市健竹科技有限公司   2021年09月07日 16:29  

一、小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)介紹


1.基本信息:

通用名:小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Anti-MHV Ab ELISA
包裝規(guī)格:48T/盒、96T/
預(yù)期用途:用于定性檢測(cè)小鼠血清樣本中的肝炎病毒IgG抗體。

2.檢驗(yàn)原理:

本試劑盒采用間接法原理定性檢測(cè)小鼠血清樣本中的肝炎病毒抗體IgG(MHV IgG)。以小鼠肝炎病毒抗原包被酶標(biāo)板,待檢小鼠血清中的肝炎病毒抗體與包被抗原反應(yīng),洗滌除去未結(jié)合的抗體,再與酶標(biāo)記的抗小鼠IgG抗體結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,再加入底物TMB顯色,終止液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),待測(cè)樣品的濃度與OD值成正比關(guān)系,并通過(guò)與CUTOFF值相比較,從而診斷受檢小鼠是否感染肝炎病毒。

主要組成成分

名稱96T配置48T配置備注
微孔酶標(biāo)板8×128×6包被小鼠肝炎病毒抗原
陰性對(duì)照1mL0.5mL不含小鼠肝炎病毒抗體,即用型
陽(yáng)性對(duì)照1mL0.5mL含一定量的小鼠肝炎病毒抗體,即用型
小鼠酶結(jié)合物12mL6mLHRP標(biāo)記的抗小鼠IgG,即用型
清洗緩沖液(10X )50mL25mL按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋
樣本稀釋液40mL20mL含磷酸鹽緩沖液
底物12mL6mLTMB需避光
終止液6mL3mL含硫酸
封板膜22無(wú)
說(shuō)明書11無(wú)
自封袋1個(gè)1個(gè)無(wú)


3、適用儀器:各類國(guó)產(chǎn)或進(jìn)口酶標(biāo)儀均可使用,檢測(cè)波長(zhǎng)450nm,參比波長(zhǎng)620/630nm。

4、儲(chǔ)存條件及有效期:

  • 試劑禁止冷凍,避免陽(yáng)光直射,在2℃8℃儲(chǔ)存條件下,未開(kāi)封試劑有效期為12個(gè)月。

  • 試劑盒開(kāi)封后,未使用完的試劑保存在2℃8℃,3個(gè)月內(nèi)試劑盒性能可保持穩(wěn)定。

  • 試劑盒生產(chǎn)日期和效期見(jiàn)試劑盒外包裝。

5、樣本收集、處理及保存方法

  • 血清:采集適量小鼠血液于1.5mL離心管中,室溫靜置3060min,3000 rpm 離心10min,收集血清樣本以備后用(建議采用心臟取血方法,獲得的血清更為清亮)

  • 保存:樣本收集后短時(shí)間(3天內(nèi))可保存于28℃,如需長(zhǎng)期保存,可分小體積凍存于-20℃一下,避免反復(fù)凍融;

  • 用于檢測(cè)的樣本應(yīng)澄清透明,避免使用溶血樣本,若有懸浮物應(yīng)離心去除。

6、檢驗(yàn)方法

測(cè)試前的準(zhǔn)備:

  • 在進(jìn)行測(cè)試前請(qǐng)先完整閱讀使用說(shuō)明書,并嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

  • 試劑盒保存在28℃,使用前室溫平衡20分鐘,從冰箱取出的濃縮清洗緩沖液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

  • 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

  • 所有液體組分使用前充分搖勻。

  • 預(yù)處理后的樣本請(qǐng)按照操作步驟用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋以達(dá)到試劑盒的最佳檢測(cè)效果。

  • 清洗緩沖液的稀釋:蒸餾水按19稀釋,即1份的清洗緩沖液加9份的蒸餾水。

  • 將恒溫箱溫度調(diào)整至37℃,待溫度穩(wěn)定后使用。

操作步驟:

  • 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用鋁箔袋密封放回4℃;

  • 設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔(100μL/孔,即用型)各1孔,空白對(duì)照1孔(雙波長(zhǎng)檢測(cè)可不設(shè)置空白對(duì)照孔);

  • 待測(cè)樣本稀釋:將樣本用樣本稀釋液按照1100的比例稀釋,(如:將待測(cè)血清按序排列在試管架上,在深孔板內(nèi)加入樣本稀釋液300μL/孔,再加待測(cè)樣本3μL,震蕩10s,)取100μL加入樣本孔,用封板膜封板膜/自封袋封住反應(yīng)孔,37℃孵育30min;

  • 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加300μL洗滌液,靜置3060s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

  • 隨后每孔加入小酶結(jié)合物100μL,空白孔除外,用封板膜/自封袋封住反應(yīng)孔,37℃30min。

  • 重復(fù)步驟4)

  • 每孔加入底物100μL,37℃避光孵育15min

  • 每孔加入終止液50μL,立即測(cè)試結(jié)果。

  • 以空白孔調(diào)零,用酶標(biāo)儀450nm單波長(zhǎng)測(cè)定各孔OD值,或直接采用450nm-620/630nm雙波長(zhǎng)測(cè)定各孔的OD值(加入終止液15min內(nèi)讀?。?。(推薦使用雙波長(zhǎng)檢測(cè))
     

7、陽(yáng)性判斷值
 

CUTOFF=2.1×陰性對(duì)照OD值;
樣本OD值≥CUTOFF,判定為陽(yáng)性;
樣本ODCUTOFF,判定為陰性;
陰性對(duì)照小于0.10時(shí)以0.10計(jì)算,0.10按實(shí)際值計(jì)算;
陰性對(duì)照OD值正常范圍應(yīng)<0.15,陽(yáng)性對(duì)照OD-陰性對(duì)照OD0.6以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立,否則實(shí)驗(yàn)可能產(chǎn)生偏差,需重新測(cè)試。
用本試劑盒檢測(cè)結(jié)果肉眼可見(jiàn)黃色,但測(cè)試結(jié)果在陽(yáng)性判斷值附近0.3OD值≥0.21的為可疑樣本,建議重新測(cè)定,動(dòng)態(tài)觀察。
 
8、檢驗(yàn)方法的局限性
  • 所有高敏感性的免疫實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),都潛在非特異性,因此不可接受的陽(yáng)性結(jié)果可能是由于ELISA方法的生物學(xué)假陽(yáng)性造成的。

  • 任何陽(yáng)性結(jié)果均需要結(jié)合小鼠自身環(huán)境,身體狀況等綜合判定。

  • 檢測(cè)為陰性的樣本不能*排除沒(méi)有MHV感染,因?yàn)椴煌瑐€(gè)體從感染到產(chǎn)生抗體的時(shí)間不同。感染初期,抗體滴度很低可能會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果,應(yīng)在714天內(nèi)復(fù)查,復(fù)查時(shí)同時(shí)平行檢測(cè)上次采集的樣本以確認(rèn)是否出現(xiàn)血清學(xué)陽(yáng)轉(zhuǎn)或滴度明顯升高。

  • 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)。

  • 本試劑盒為定性試劑,不能作為定量試劑使用。

9、注意事項(xiàng)
  • 操作前仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行試驗(yàn)操作。

  • 不得混用不同批號(hào)的試劑,不要使用超過(guò)有效期的試劑。

  • 微孔板須密封防潮,從冷藏環(huán)境中取出時(shí),應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開(kāi)啟使用,余者封存置28℃短期內(nèi)使用。

  • 微量移液器吸嘴不可混用,以免交叉污染。

  • 孔內(nèi)樣本需震蕩混合均勻,避免有氣泡存在。

  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

  • 應(yīng)嚴(yán)格遵守標(biāo)本收集與儲(chǔ)存的要求,若標(biāo)本混濁,請(qǐng)離心棄沉淀后再使用。

  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物處理。

  • 由于方法學(xué)或抗體特異性等原因,使用不同生產(chǎn)商的試劑對(duì)同一份樣本進(jìn)行檢測(cè)可能會(huì)得到不同的測(cè)試結(jié)果,因此,用不同試劑檢測(cè)所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較,以免造成錯(cuò)誤的結(jié)果解釋。

  •  

  • 陽(yáng)性符合率:用10份企業(yè)陽(yáng)性參考品檢測(cè),結(jié)果不得出現(xiàn)假陰性;

  • 陰性符合率:10份企業(yè)陰性參考品檢測(cè),結(jié)果不得出現(xiàn)假陽(yáng)性;

  • 特異性:測(cè)試小鼠鼠痘病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠呼腸孤病毒III型、小鼠細(xì)小病毒、小鼠仙臺(tái)病毒陽(yáng)性血清無(wú)交叉反應(yīng);

  • 重復(fù)性:批間差及批內(nèi)差均均15%。

 

二、小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)優(yōu)勢(shì)
 

1、與競(jìng)品比較

 

2、產(chǎn)品圖片

3、試劑盒的性能

 

 

4、證書



 

三、公司介紹

 

深圳健竹科技技術(shù)有限公司成立于2016年,致力于生命健康產(chǎn)業(yè)中的體外診斷(IVD)行業(yè),專注于即時(shí)檢測(cè)(PDCT,健竹科技的即時(shí)檢測(cè)技術(shù)在國(guó)際上影響力很大。

公司除自有即時(shí)檢測(cè)技術(shù)、產(chǎn)品之外。還提供:檢測(cè)、研究實(shí)驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品,雜質(zhì)、色譜柱耗材、化學(xué)試劑及相關(guān)定制服務(wù)。法國(guó)CPA、clearsynth、Glpbio、NEST耐思、海爾生物、天美等品牌的授權(quán)代理商。

公司圖片

公司研發(fā)實(shí)力

深圳健竹科技技術(shù)有限公司有一支國(guó)際化專家團(tuán)隊(duì)組成,主要包含專業(yè)領(lǐng)域的專家、教授,以及美國(guó)有名的生物顧問(wèn)團(tuán)隊(duì),擁有博士、碩士學(xué)位,以技術(shù)創(chuàng)新及科技研發(fā)為主,集思廣益,共同致力于項(xiàng)目研發(fā)及公司的發(fā)展。

 

我們的實(shí)驗(yàn)室

 

 

公司提供服務(wù)

一、體外診斷類:即時(shí)診斷試劑;納米磁珠、膠體微球等原料;抗體、抗原

二、實(shí)驗(yàn)檢測(cè)類:標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品;藥物雜質(zhì)定制服務(wù);實(shí)驗(yàn)室耗材;試劑

 


關(guān)于更多小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法資訊,可以關(guān)注公眾號(hào):健竹科技!

 

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