淋巴細胞分離液是一種根據細胞密度差異,借助離心產生的重力加速度,進行細胞的分離純化的常用試劑。常用的淋巴細胞分離液有Ficoll淋巴細胞分離液、Percoll淋巴細胞分離液。Ficoll與Percoll分離單個核細胞的方法均為密度梯度離心法。
分離原理:外周血中單個核細胞和單核細胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細胞不同,淋巴細胞分離液是一種密度介于1.075~1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,從而將各種血細胞加以分離。
淋巴細胞分離液的使用方法:
1、準備無菌的15ml離心管或錐形管;
2、加入淋巴細胞分離液3ml;(注意:淋巴細胞分離液使用前需恢復室溫,18-25℃)
3、Hank~s液或PBS緩沖液1:1比列(如果全血樣本粘稠,可適當增大比例)稀釋抗凝過的全血樣品。
4、小心沿著壁管,接近分離液層面,非常緩慢地加入新鮮的稀釋過的全血樣品在淋巴細胞分離液上面;(切記不要攪渾淋巴細胞分離液)
5、小心放進離心機(水平轉子),4℃離心20-30分鐘,速度為400g-1000g;(注意:離心機剎車應取消,需等待自然停止)
6、小心取出離管,切記不要震動;
7、可見上層為淡紅色透明血漿,其次為薄薄的只密白色環(huán),白色環(huán)衛(wèi)單核細胞淋巴細胞。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。