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Akt調(diào)節(jié)切應(yīng)力誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞Bmi-1基因的表達

來源:上海泉眾機電科技有限公司   2021年09月10日 15:38  

骨髓間充質(zhì)干細胞 ( bone mesenchymal stem cells,BMSCs) 是一種來源于中胚層的多能干細胞,具有多向分化潛能。干細胞在體內(nèi)生長的局部微環(huán)境(包括細胞外基質(zhì)、細胞因子在內(nèi)的基質(zhì)微環(huán)境和復(fù)雜的力學(xué)微環(huán)境共同組成) 對其分化走向起重要的調(diào)控作用。流 體 切 應(yīng) 力( fluid shear stress,F(xiàn)SS)對骨重塑、骨基質(zhì)細胞活性及分化起著十分重要的作用。


研究發(fā)現(xiàn),不同作用形式的 FSS 刺激可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)干細胞的基因表達變化,從而調(diào)控其生長和分化走向。不同強度 FSS( 0. 2 ~ 10.0 Pa)對人 BMSCs 的遷移調(diào)節(jié)不一樣。因此,理解 BMSCs 在力學(xué)因素作用下的行為,是進一步在組織工程中實現(xiàn)通過力學(xué)因素誘導(dǎo)其增殖、分化的基礎(chǔ)。


因此,此實驗利用平行平板流動腔系統(tǒng)對大鼠 BMSCs 施加不同強度 FSS,檢測 Bmi-1 基因表達,并采用不同信號通路的特異性阻斷劑,探討其中可能的力學(xué)信號傳導(dǎo)機制。相關(guān)研究成果發(fā)表在 醫(yī)用生物力學(xué) 題為《 Akt 調(diào)節(jié)切應(yīng)力誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞 Bmi-1 基因的表達》。




相關(guān)實驗示意圖











實驗結(jié)果


1、1.5 Pa FSS 作用不同時間點對 BMSCs 中 Bmi-1 基因表達的影響

Real-time PCR 結(jié)果顯示,BMSCs 在流體剪切力作用 1 h 后,Bmi-1 基因表達即明顯增強,兩者之間有顯著性差異( P < 0. 05) ;而且隨著刺激時間的延長,Bmi-1 基因表達也隨之增強( 見圖 1) 。


2、不同強度 FSS 對 Bmi-1 基因表達的影響

與無 FSS 刺激組相比,F(xiàn)SS 加載各組均能明顯增強 Bmi-1 基因的表達,且呈強度依賴,高 FSS 組zui明顯。組間比較發(fā)現(xiàn),Bmi-1 mRNA 的增高,低 FSS 組和中等 FSS 組差異; 而高FSS 組 與 中 等 FSS 組相比又明顯增高 ( P < 0. 05,見圖 2) 。




3、1.5 Pa FSS 激活 BMSCs p-Akt 和 p-ERK

Western blotting 實驗結(jié)果顯示,F(xiàn)SS 呈時間依賴性激活 BMSCs Akt 和 ERK 的磷酸化; 其中, FSS 處理后磷酸化水平增加,30 min 達高峰,此后磷酸化水平呈逐漸下降趨勢( 見圖 3) 。


4、不同抑制劑對 Bmi-1 基因表達的影響

結(jié)果顯示,加入 DMSO 的單純受力組與同樣加入 DMSO 的靜止組比較,Bmi-1 表達顯著增高; 而加入 wortmannin 組 與 加 入 DMSO 的單純受力組比較, Bmi-1表達被抑制( P < 0. 05) ,但加入 PD98059 組與加入 DMSO 的單純受力組比較,Bmi-1 表達沒有影響( 見圖 4) 。



實驗結(jié)論

綜上所述,此研究利用平行平板流動腔系統(tǒng)產(chǎn)生的 FSS,可誘導(dǎo) BMSCs 中 Bmi-1 mRNA 的表達,并且其表達量與刺激時間和力的強度密切相關(guān),其中Akt 信號分子可能對 Bmi-1 基因的表達調(diào)控起關(guān)鍵作用。







參考文獻:王維娜,孫曉東,邱紫菡,王漢琴,黃鐵柱;Akt調(diào)節(jié)切應(yīng)力誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞Bmi-1基因的表達;醫(yī)用生物力學(xué); 第32卷,第一期,2017年2月;DOI: 10.16156 /j.1004-7220.2017.01.012
圖片來源:實驗結(jié)果圖來源于參考文獻

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