全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)組成部分的作用和功能介紹
全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)是讓標(biāo)記有熒光素的探針與模板DNA 混合后,完成高溫變性,低溫復(fù)性,適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律,與模板DNA互補配對的探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴增而變化熒光信號強度,求得Ct值,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對照,即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。
全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)主要組成部分的功能及作用:
溫度傳感器:溫度傳感器可感知當(dāng)前溫度,反饋到計算機中,計算機自動設(shè)定溫度,通過控制熱循環(huán)系統(tǒng)的工作情況設(shè)定溫度。
熒光檢測元件:光電倍增管(PMT)在可見光波范圍內(nèi)是靈敏的探測器,它屬于單點探測器并要求掃描系統(tǒng)對微陣列上的樣品進(jìn)行空間定位,通過改變電壓可以很方便的改變光電倍增管的靈敏度。光電倍增管具有高靈敏度、高信噪比、大動態(tài)范圍等特點。熒光信號通過光電倍增管被轉(zhuǎn)換為電信號,再經(jīng)過信號放大、濾波、去噪化處理,其檢測水平可達(dá)到單個光子。
熱循環(huán)系統(tǒng):采用電阻薄膜加熱和壓縮機制冷技術(shù),達(dá)到加熱制冷的作用。
激發(fā)光源:目前常用激發(fā)光源主要有四種:鎢燈泡、氬離子激光、發(fā)光二極管(LED)、固態(tài)激光。鎢燈泡價格適中,但其壽命短、預(yù)熱耗時,需要濾光片,光譜偏紅光;氬離子激光亮度高、可發(fā)出單或雙波長,聚焦好,但需移動掃描、壽命短、純度不高;LED體積小、可輸出不同波長的光,但光源純度差、壽命短;固態(tài)激光器能量高,輸出功率大,發(fā)出的激光光源光學(xué)純度高,可輸出不同波長的光源、質(zhì)量優(yōu)秀,壽命長。因此固態(tài)激光器光源*符合熒光PCR的技術(shù)要求,是一種優(yōu)秀的激發(fā)光源。但價格較昂貴。
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