中性紅是一種組織學(xué)復(fù)染色染色劑,可用來為溶酶體、高爾基體和尼斯?fàn)柺狭H旧瑫r(shí)也是酸堿指示劑。
中性紅也是一種活體染劑,因?yàn)殡S著細(xì)胞逐漸死亡,它們吸收中性紅的能力也會(huì)變差。
原理:
中性紅是一種弱堿性 pH 指示劑,變色范圍 pH6.4~8.0之間(由紅變黃)。在中性或微堿性環(huán)境中,植物的活細(xì)胞能大量吸收中性紅并向液泡中排泌,由于液泡在一般情況下呈酸性反應(yīng),因此,進(jìn)入液泡的中性紅便解離出大量陽離子而呈現(xiàn)櫻桃紅色,在這種情況下,原生質(zhì)和細(xì)胞壁一般不著色;死細(xì)胞由于原生質(zhì)變性凝固,細(xì)胞液不能維持在液泡內(nèi),因此,用中性紅染色后,不產(chǎn)生液泡著色現(xiàn)象,相反,中性紅的陽離子,卻與帶有一定負(fù)電荷的原生質(zhì)及細(xì)胞核結(jié)合,而使原生質(zhì)與細(xì)胞核染色。
制備:
中性紅是由N,N-二甲基對亞硝基/苯/胺鹽酸鹽與甲/ben-2,4-二胺制取。
將二甲基/ben胺加到5℃的鹽酸水溶液中,攪拌使之溶解,然后邊攪拌邊加入亞硝suan鈉水溶液進(jìn)行反應(yīng),溫度控制在5~10℃:
攪拌反應(yīng)1H后,過濾,結(jié)晶對亞硝基二甲基/ben/胺鹽酸鹽用少量水洗滌后備用。將硫酸亞鐵用90℃熱水溶解,然后加入2,4-二氨基甲/ben,充分?jǐn)嚢枞芙夂?,慢慢加入制得的對亞硝基二甲?ben/胺鹽酸鹽,攪拌反應(yīng):
1h后,補(bǔ)加適量鹽酸,過濾。濾液中通入氯化氫氣體,靜置,待結(jié)晶*后過濾,干燥,即為中性紅成品。
用途:
1.用作酸堿指示劑,變色范圍pH值6.8(紅)~8.0(橙黃);氧化還原指示劑;活體及細(xì)胞的染色劑。
2.用作萃取光度法測定碘、汞等的試劑。還用作生物染色劑。
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