細(xì)節(jié)化的解析細(xì)胞程序降溫儀應(yīng)用原理

　生物樣本大都對(duì)溫度J其敏感，尤其是細(xì)胞樣本、制品。隨著細(xì)胞治療的快速發(fā)展，細(xì)胞冷凍技術(shù)及效果變得更加重要?，F(xiàn)在也有一些冷凍降溫是通過(guò)高溶度的凍存保護(hù)劑保障活率，大劑量的凍存保護(hù)劑往往對(duì)細(xì)胞、回輸受體有害，如何安全有效的提高細(xì)胞及制劑的冷凍效果，是一個(gè)重要步驟。

　　二、生物樣本凍存步驟

　　生物樣本凍存步驟：干細(xì)胞采集或分離培養(yǎng)→產(chǎn)品收集或分裝（冷凍血袋或凍存管等）→預(yù)冷（一般4℃）→ 添加冷凍保護(hù)劑→ 程序降溫→儲(chǔ)存槽暫存→轉(zhuǎn)移→長(zhǎng)期存儲(chǔ)

　　 生物樣本凍存步驟

　　生物樣品的成功凍存不僅取決于合適的冷凍保護(hù)劑，更取決于冷凍的速率、精度高的溫度控制和合理的溫度梯度（50℃~80℃）。

　　在細(xì)胞凍存的過(guò)程中，樣本內(nèi)水分會(huì)從液相轉(zhuǎn)變?yōu)楣滔?，水分也隨之散失，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鹽、代謝物濃度改變，進(jìn)而造成滲透壓失衡，直接影響凍存細(xì)胞的復(fù)蘇。同時(shí)冷凍的速率太快或者太慢，容易導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)水分喪失或形成大冰晶，都不利于細(xì)胞存活。另外，生物樣本內(nèi)水分的相變過(guò)程也伴隨著潛熱釋放的現(xiàn)象，在從液相轉(zhuǎn)變?yōu)楣滔鄷r(shí)會(huì)釋放出大量熱量，使樣本溫度瞬速上升，細(xì)胞往往會(huì)在溫度劇烈變化中死亡。通過(guò)使用細(xì)胞欣諭程序降溫儀，選擇合適的凍存液，設(shè)定合適的升降溫速率，可有效地克服上述不利因素。實(shí)踐證明，（經(jīng)溫度補(bǔ)嘗后）每分鐘1-3℃的冷凍速率可大大提高凍存細(xì)胞的存活率。

　　從液相轉(zhuǎn)變?yōu)楣滔鄷r(shí)釋放出大量熱量

傳統(tǒng)的生物樣本降溫通常采用-80℃低溫冰箱進(jìn)行分步驟冷凍，該方法的不足為：耗時(shí)長(zhǎng)，整個(gè)降溫過(guò)程大約需要一天的時(shí)間；在降溫過(guò)程中需要人為多次轉(zhuǎn)移，給樣本的降溫帶來(lái)眾多不可控因素，從而導(dǎo)致樣本的存活率降低；無(wú)法有效地消除結(jié)晶過(guò)程中釋放的潛熱，增大了樣本的死亡率。

當(dāng)然還有一些特殊生物樣品的制備工藝和程序降溫需要的溫度更低，所以更需要程序降溫儀這款設(shè)備，目前欣諭品牌程序降溫儀可以控制溫度40~--180度，溫度點(diǎn)控制準(zhǔn)確度小于等于0.5度。

生物樣品的成功凍存取決于冷凍的速率，精度高的溫度控制和合理的溫度梯度（+40℃ -180℃）。當(dāng)溫度降至-180℃時(shí)，大部分生物樣品可轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期保存。