人DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌方法：

1. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。

3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。

5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng)，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞；BNL 1ME A.7R.1

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞；CT26.WT [CT26WT]

小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞；F9

小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤；M5076

小鼠正常肝細(xì)胞；NCTC 1469 [NCTC1469]

小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]

正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞；TM3

正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞；TM4

615小鼠乳腺癌瘤株；Ca759

615小鼠乳腺癌瘤株；Ca761

615小鼠乳腺癌瘤株；Ca763

615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712

615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7912

615小鼠肺癌瘤株；HP615

615小鼠滑膜肉瘤瘤株；ZM755

615小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株；P615

小鼠肝癌瘤株；H22

615小鼠前胃癌瘤株；Fc

KM小鼠子宮頸癌瘤株；U14

KM小鼠子宮頸癌瘤株；U27

KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株；LⅡ

KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株；G422

615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株；L615

艾氏腹水瘤瘤株；Ehrlich

T739小鼠肺腺癌瘤株；LA795

小鼠肉瘤瘤株；S180

C57小鼠黑色素瘤瘤株；ME （Me）

615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株；DCS

KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株；B22

小鼠黑色素瘤瘤株；B16

小鼠Lewis肺癌瘤株；LLT

BALB/C小鼠肝瘤株；BNL 1ME A.7R.1

小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F1

小鼠T淋巴瘤細(xì)胞（雞OVA基因修飾）；E.G7-OVA

小鼠骨髓瘤細(xì)胞；P3/NSI/1-Ag4-1

小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；W6/32

雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7B5