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人DNA修復(fù)基因XRCC1ELISA檢測(cè)試劑盒?操作步驟

來源:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司   2021年09月28日 16:46  

人DNA修復(fù)基因XRCC1ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

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小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA

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小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7

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小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)

小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFP

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFP

小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFP

C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA

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雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3

雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8

雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A4

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小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2

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