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致力于簡(jiǎn)化熒光定量實(shí)驗(yàn)進(jìn)程的性能怪獸
—— 致力于簡(jiǎn)化熒光定量實(shí)驗(yàn)進(jìn)程的性能怪獸
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix用Universal ROX替代了傳統(tǒng)ROX，彌補(bǔ)不同儀器平臺(tái)的光程差，實(shí)現(xiàn)了適合所有qPCR儀器。另外，該產(chǎn)品采用抗體法修飾，同時(shí)配方添加了基因擴(kuò)增的促進(jìn)因子，大大提升了該產(chǎn)品的擴(kuò)增性能。
產(chǎn)品特點(diǎn)
全儀器平臺(tái)通用：預(yù)混特定類型參比染料，無(wú)需調(diào)整ROX濃度；
易于示蹤：藍(lán)色預(yù)混液，觀察顏色可直接區(qū)分是否加樣；
強(qiáng)穩(wěn)定性：室溫配制體系，配制后的體系可4℃放置24 h，檢測(cè)結(jié)果無(wú)變化；
上機(jī)快速：兼容常規(guī)程序與快速程序，最快46 min完成定量實(shí)驗(yàn)；
擴(kuò)增性能好：擴(kuò)增效率高，特異性好，可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)基因。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
圖1. Hieff UNICON® Universal Blue 預(yù)混液可實(shí)現(xiàn)全平臺(tái)通用。針對(duì)不同儀器平臺(tái)，與T品牌對(duì)比，Hieff UNICON® Universal Blue 預(yù)混液Ct值起峰更加靠前。以2 µL的質(zhì)粒10倍梯度稀釋液為模板，擴(kuò)增IL23R基因。
靈敏度高，可檢測(cè)低至單拷貝的質(zhì)粒DNA
圖2.Hieff UNICON® Universal Blue 預(yù)混液可有效檢測(cè)7個(gè)數(shù)量級(jí)范圍的模板量，擴(kuò)增效率高，可在寬廣的線性范圍內(nèi)獲得良好的線性關(guān)系。以2 µL的106-100拷貝/µL的質(zhì)粒為模板，擴(kuò)增人IL23R基因。
檢出率和特異性良好，廣泛適用于不同GC含量基因
圖3. Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液可實(shí)現(xiàn)不同引物的高特異性擴(kuò)增。 以293T細(xì)胞cDNA為模板，利用Primer5軟件設(shè)計(jì)200 bp擴(kuò)增長(zhǎng)度的片段（GC%含量30%-70%）的引物共1000對(duì)，隨機(jī)挑選27對(duì)，使用Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液檢測(cè)引物的擴(kuò)增效率和反應(yīng)特異性，在寬廣的基因GC范圍內(nèi)，該預(yù)混液可保證*的特異性基因檢出。
靈敏度高，可檢測(cè)低至單拷貝的質(zhì)粒DNA
圖4. Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液可精準(zhǔn)分辨2倍表達(dá)量差異，且具備良好的重復(fù)性 A: 以293T細(xì)胞cDNA原液進(jìn)行2倍梯度稀釋，擴(kuò)增GAPDH基因，Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液可精準(zhǔn)區(qū)分2倍模板濃度差異。B: 以293T細(xì)胞20倍cDNA稀釋液為模板，擴(kuò)增GAPDH基因，設(shè)置90個(gè)復(fù)孔，Ct值標(biāo)準(zhǔn)偏差＜0.2。
兼容快速程序與標(biāo)準(zhǔn)程序
GC含量 | 30% | 40% | 50% | 55% | 60% | 65% | 70%-1 | 70%-2 |
標(biāo)準(zhǔn)程序 | 24.95 | 24.175 | 23.79 | 15.615 | 23.22 | 23.675 | 24.905 | 28.21 |
快速程序 | 25.39 | 24.435 | 23.995 | 15.835 | 23.915 | 23.655 | 25.16 | 29.27 |
△Ct值 | 0.44 | 0.26 | 0.21 | 0.22 | 0.70 | -0.02 | 0.25 | 1.06 |
圖5.Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液可大大縮短擴(kuò)增時(shí)間 以293T細(xì)胞cDNA的20倍稀釋液為模板，分別使用標(biāo)準(zhǔn)程序和快速程序擴(kuò)增不同GC的基因片段（30%-70%），結(jié)果顯示，可兼容標(biāo)準(zhǔn)程序和快速程序，縮短擴(kuò)增時(shí)間。對(duì)于個(gè)別△Ct＞0.5的基因建議使用標(biāo)準(zhǔn)程序。
良好的穩(wěn)定性，讓體系配制更加靈活
4℃體系保存 | 0h | 24h | 48h | 72h |
Ct均值 | 23.29 | 23.33 | 23.33 | 23.04 |
△Ct值 | 0.04 | 0.04 | -0.25 |
圖6. Hieff UNICON® Universal Blue預(yù)混液在體系配制后4℃放置不同時(shí)間條件下，檢測(cè)人C2orf68基因擴(kuò)增情況。結(jié)果顯示體系配制后4℃保存24 h，擴(kuò)增性能無(wú)變化。
翌圣qPCR mix已發(fā)表文獻(xiàn)（部分）
【1】Yu Qiong, et al. "RNA demethylation increases the yield and biomass of rice and potato plants in field trials." Nature biotechnology. (2021): doi:10.1038/S41587-021-00982-9. (IF=54.908)
【2】Dong, W., et al. "An SHR–SCR module specifies legume cortical cell fate to enable nodulation." Nature. (2020). (IF=42.778)
【3】Lu, X. Y., et al. "Feeding induces cholesterol biosynthesis via the mTORC1–USP20–HMGCR axis." Nature (2020):1-6. (IF=42.778)
【4】Bi, X., et al. "Tracing the genetic footprints of vertebrate landing in non-teleost ray-finned fishes." Cell W1(2021). (IF=38.637)
【5】Liu, S. , et al. "RNA polymerase III is required for the repair of DNA double-strand breaks by homologous recombination." Cell 184.5(2021). (IF=38)
【6】Liu, C. X., et al. "Structure and Degradation of Circular RNAs Regulate PKR Activation in Innate Immunity." Cell (2019). (IF=31.398)
【7】Han, X., et al. "Mapping the Mouse Cell Atlas by Microwell-Seq." Cell 172.5(2018):1091-1107.e17. （IF=30.410）
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品定位 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 目錄價(jià)/元 |
高靈敏通用型定量預(yù)混液（SYBR Green法） | Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix | 11184ES08 | 5 mL | 663 |
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普通型定量預(yù)混 液 (SYBR Green法） | Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No/Low/High Rox Plus) | 11201/11202/ 11203ES08 | 5 mL | 498 |
Kit | Hifair® II 1st Strand Cdna Synthesis Kit | 11119ES60 | 100 T | 755 |
Kit(含gDNA去除步驟) | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) | 11121ES60 | 100 T | 935 |
高靈敏度Kit (含gDNA去除步驟) | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) | 11139ES60 | 100 T | 1303 |
預(yù)混液(含gDNA去除步驟) | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11123ES60 | 100 T | 955 |
高靈敏度預(yù)混液(含gDNA去除步驟) | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11141ES60 | 100 T | 1383 |
HB210926
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