(1)取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養(yǎng)成功,取材時應(yīng)盡量在4~6h內(nèi)能制作成細胞,盡快入箱培養(yǎng),若不能即時培養(yǎng),應(yīng)將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),于4℃存放。若組織塊較大,應(yīng)在清除表面壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后,切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放,但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋巴組織應(yīng)加入含10%二甲基亞砜的培養(yǎng)基,按細胞凍存方式于液氮中冷凍保存。
(2)取材應(yīng)嚴(yán)格無菌 所取標(biāo)本材料應(yīng)在無菌條件下進行,為了確保無菌,對所取材料若疑有污染的可能,應(yīng)將所取組織在含高濃度抗菌素(400單位/mL)甚加入適量的兩性霉素B或10%達克寧液的培養(yǎng)液內(nèi)于4℃下存放2小時以上,再用PBS洗2~3次,以確保所取材料無菌。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養(yǎng)液(內(nèi)含400單位/mL抗菌素)的小瓶等便于攜帶的物品來取材,所取材料應(yīng)避免接觸有毒有害的化學(xué)物質(zhì),如碘、汞等。
(3)取材和原代細胞制作時,要用鋒利的器械,如手術(shù)刀或剃須刀片切碎組織,盡可能減少對細胞的機械損傷。
(4)要仔細去除所取材料上的血液、脂肪、壞死組織及結(jié)締組織,切碎組織時應(yīng)避免組織干燥,可在含少量培養(yǎng)液的器皿中進行。
(5)取材應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等,一般來講,胚胎組織較成熟個體組織容易培養(yǎng),分化低的較分化高的組織容易生長,腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng)。取材時應(yīng)盡量選用易培養(yǎng)的組織進行培養(yǎng)。
(6)原代細胞取材時要同時留好組織學(xué)標(biāo)本和電鏡標(biāo)本。對組織的來源、部位、包括供體的一般情況要做詳細的記錄,以備以后查詢。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。