1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
凋亡相關(guān)因子配體(FASL)重組蛋白
凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)重組蛋白
毒蕈堿型膽堿受體M1(CHRM1)重組蛋白
毒蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)重組蛋白
端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)重組蛋白
多巴胺受體D1(DRD1)重組蛋白
多巴胺受體D2(DRD2)重組蛋白
多巴胺受體D3(DRD3)重組蛋白
多巴色素異構(gòu)酶(DT)重組蛋白
多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白
多聚免疫球蛋白受體(PIGR)重組蛋白
多效生長因子(PTN)重組蛋白
多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1(MRP1)重組蛋白
二胺氧化酶(DAO)重組蛋白
二氫二醇脫氫酶2(DDH2)重組蛋白
二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)重組蛋白
二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙?;?DLAT)重組蛋白
發(fā)動蛋白2(DNM2)重組蛋白
泛素(Ub)重組蛋白
泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白
泛素交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)重組蛋白
泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)重組蛋白
泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白
防御素β103B(DEFβ103B)重組蛋白
相關(guān)產(chǎn)品
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