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教您幾招,如何鑒別偽劣ELISA試劑盒

來源:上海滬震生物科技有限公司   2021年10月14日 14:00  

做實驗最怕的是什么?

早起搶儀器?

熬夜寫報告?

放假看文獻?


都不是!

最怕的是——

辛辛苦苦做了很久的實驗,

到最后才發(fā)現買的試劑盒居然是假的

那才叫一夜回到解放前


我們閱讀大量的文獻

精心設計實驗課題

事無巨細的實驗流程

這一切的努力就是為了

有一個滿意的實驗結果

可是,每當實驗結果出現偏差

我們大都只會反復檢查樣品、模板、引物序列等

很少有人會質疑購買的試劑產品

尤其是那些進口、的產品

然而,產品無處不在


在國內生物研討蓬勃發(fā)展的如今,冒充無視科學研討的謹慎性和嚴肅性,讓廣闊的科研工作者被迫造假,嚴重破壞了科研空氣,擾亂了市場秩序,滬震生物整理了一些辨別這些偽劣ELISA試劑盒的辦法,供廣闊的科研工作者和用戶參考,讓期望對廣闊科研工作者有所協助。


事實上無論在國內還是在國外,都會存在偽劣產品,我們要擦亮眼睛學會鑒別,假不亂真,假貨的出現和傳播也同樣有它的內在規(guī)律,以下是假試劑常見的現象,希望大家以后盡量避免買到假貨。

常見現象


1.抗體的有效性用

重組蛋白生產的抗體不一定會和天然蛋白有效結合,必須用生物體中的蛋白去驗證重組蛋白生產的看題的有效性;


2.稀釋真品

想摻水的假酒一樣,不良商家將一份抗體稀釋成五份銷售,使抗體效價下降,與說明書標注的嚴重不符,這是試劑造假中慣用的小伎倆;


3.進口分裝

正規(guī)品牌為了保證產品質量和品質的穩(wěn)定性,不會搞出口分裝,因為試劑盒中試劑都是一一對應的,很難給分裝試劑的空間,如果是進口分裝,十有八九是假貨;


4.濫竽充數,以次充好

不法商販以一些來歷不明的試劑以次充好,瓶子是回收的,質量無法保證,


5.無同源性指標出現相似的標準品數值

兩個不同甚至沒有序列同源性的試劑盒,經歷了交叉實驗后,標準品數值相似甚至相同,那么必定是假貨無疑了;


6.檢查種屬

用不同種屬的試劑盒替代,由于同一種蛋白有一定同源性,實驗結果的準確性可能會差一點


7.替換指標,真假混賣

用TGFβ以假亂真,TGFβ是在大多數哺乳類動物中廣泛表達的物質,其種屬間抗原的氨基酸序列同源性達到100%,但在實驗中會隨其他因子影響而導致表達水平發(fā)生相應變化,這些變化很難被察覺,有了這些萬能指標,公司就能以假亂真。

面對這一個假貨橫行的市場,該如何鑒別ELISA試劑盒的真假?

采購前




辦法一
向廠家索要或從其下載闡明書,查找ELISA的性能目標:準確度(加標回收率、稀釋線性)、精密度(板內差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準。一般來說,除了校準不一定每份闡明書都有外,其他的目標一般都需求羅列(有些樣本需求高倍稀釋的,也許沒有準確度這個目標)。假如無法供給這些性能目標,則闡明該試劑盒也許是假貨,或許試劑盒開發(fā)進程不行科學謹慎,有也許無法檢查出真實的樣本值。

辦法二
關于夸張ELISA包括的目標的規(guī)模,尤其是不常見的種屬,可先到世界ELISA試劑盒供貨商上查找,假如查找不到該種屬的ELISA試劑盒,則有也許是假貨,需求小心翼翼。

辦法三
將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關鍵詞在網上查找,


采購后




辦法一
查看闡明書、包裝盒的質量,一般冒充偽劣產品為了降低成本,打印的質量會比較差。其次仔細閱讀闡明書,如上所示查找ELISA的性能目標。

辦法二

1.假如采購了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,使用穿插試驗即可辨別ELISA試劑盒是不是造假,辦法如下: 

(1) 取出采購的試劑盒A的包被板兩條。

(2) 一條包被板加試劑盒A的規(guī)范品做規(guī)范曲線。

(3) 另一條包被板加試劑盒B的規(guī)范品做規(guī)范曲線。

(4) 后續(xù)操作依照試劑盒闡明書進行,加檢查抗體、酶復合物和底物。

(5) 試驗結束后,檢查兩條規(guī)范曲線,假如兩條規(guī)范曲線共同則闡明兩個ELISA試劑盒檢查的同一個目標而非A和B,即該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。

(6) 假如兩條規(guī)范曲線不共同則闡明兩個ELISA試劑盒檢查的不一樣目標,試劑盒A只能檢查A,不能檢查B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。


2. 使用攪擾試驗即可辨別ELISA試劑盒是不是檢查意圖抗原,辦法如下: 

(1) 將對于試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢查抗體裝備成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液

(2) 37℃孵育15分鐘后,替代原試劑盒中的檢查抗體

(3) 后續(xù)操作依照試劑盒闡明書進行,加檢查抗體、酶復合物和底物

(4) 試驗結束后,檢查其規(guī)范曲線,假如規(guī)范曲線良好則闡明參加的意圖抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢查抗體對于的對錯意圖抗原,該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。

(5) 假如規(guī)范曲線無線性,則闡明試劑盒檢查抗體已被意圖抗原中和或攪擾,影響了其實踐試劑盒抗體的檢查效果,則該試劑盒檢查抗體對于的是意圖抗原。

偽劣的ELISA試劑盒坑害廣大的科研工作者,他們往往唯利是圖,無視科學研究的嚴謹性和嚴肅性,讓廣大的科研工作者被動造假,嚴重擾亂了科研工作,



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