原代細(xì)胞復(fù)蘇的基本操作方法

來源：武漢尚恩生物技術(shù)有限公司 2021年10月19日 10:07

　　原代細(xì)胞復(fù)蘇實驗準(zhǔn)備:

　　(1)儀器：凈化工作臺、離心機(jī)、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱

　　(2)玻璃器皿：吸管(彎頭、直頭)、培養(yǎng)瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、廢液缸

　　(3)塑料器皿：吸頭、槍頭、膠塞、移液管(10ml)、15ml離心管、凍存管(1～2ml)

　　(4)其他物品：微量加樣槍、紅血球計數(shù)板、記號筆、醫(yī)用橡皮膏、移液槍

　　(5)試劑：PBS、小牛血清、培養(yǎng)液、雙抗(青霉素、鏈霉素)、胰蛋白酶(0.08%)

　　原代細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:

　　(1)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化。

　　(2)從37℃水浴中取出凍存管，75%酒精消毒后，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管中。PriCells推薦接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

　　(3)離心，1000rpm，5min。PriCells推薦不離心。

　　(4)棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。PriCells推薦小牛血清濃度依據(jù)原代細(xì)胞種類。

　　(5)次日更換一次1/2培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

　　注意事項:

　　(1)將凍存管從液氮容器中取出時，要做好防護(hù)工作，以免凍傷。

　　(2)取出凍存管后立即放入水浴中，使其盡快融化(在1-2分鐘內(nèi))。

　　(3)復(fù)蘇好用新配制的培養(yǎng)液。

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影