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飼料液相色譜儀的色譜柱清洗方法你學(xué)會(huì)了嗎？
飼料液相色譜儀硅膠色譜柱在清洗時(shí)，強(qiáng)溶劑洗不掉色譜柱上殘留的污染物。然后需要使用更強(qiáng)的溶劑或多種溶劑來(lái)清洗色譜柱。一般來(lái)說(shuō),所有的清潔方法都有相似的模式,使用的溶劑隨著溶劑強(qiáng)度的增加而增加，后一種溶劑通常是非常疏水的(如乙酸乙酯)，可用于溶解非極性物質(zhì)，如脂類和油脂。使用多種溶劑時(shí)，確保每種溶劑都可以與下一種溶劑混溶。在清洗過(guò)程結(jié)束時(shí)，必須使用中等強(qiáng)度的可混溶溶劑返回原始溶劑系統(tǒng)。
以下溶劑可用于硅膠鍵合柱常用的緩沖溶液：
100％甲醇、100％乙腈、75％乙腈-25％異丙醇、100％異丙醇、100％二氯甲烷和100％正己烷。
使用二氯甲烷或正己烷后，因?yàn)樵谑褂迷妓嗳軇┲氨仨氂卯惐记逑慈軇┫嗳莸纳V柱，所以每種溶劑應(yīng)清洗至少10倍的色譜柱體積。
要恢復(fù)原始溶劑系統(tǒng)，不必沖洗每一步，中間步驟可以跳過(guò)。在中間步驟中，可以使用異丙醇，然后使用無(wú)緩沖液的流動(dòng)相，最后恢復(fù)初始流動(dòng)相配置。四氫呋喃是常用的另一種去除污染的溶劑。如果色譜柱被嚴(yán)重污染，二甲基亞砜或二甲基甲酰銨和水可以以50∶50的比例混合，并以低于0.5ml/min的流速流過(guò)色譜柱反相柱的成功再生是一個(gè)非常耗時(shí)的過(guò)程，并且溶劑洗滌可以通過(guò)梯度洗脫系統(tǒng)操作。另一個(gè)問題是色譜柱在清洗過(guò)程中是否會(huì)被反沖，因?yàn)榇蟛糠謴?qiáng)烈保留的污染物會(huì)積聚在色譜柱頭上，這反過(guò)來(lái)會(huì)縮短被沖出色譜柱的污染物的移動(dòng)距離。考慮到填充柱的穩(wěn)定性，大多數(shù)液相色譜柱的填充壓力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常操作壓力，因此它們的床層不應(yīng)受到反向流速的影響。然而，如果頭部的燒結(jié)直徑大于尾部的燒結(jié)直徑例如，尾部燒結(jié)的孔徑為2μm，這通?？梢员３痔盍系钠骄讖綖?μm。如果孔徑大于填充粒度分布曲線的最小粒度，一些填料會(huì)通過(guò)這些間隙流出色譜柱，這將導(dǎo)致空白空間。
清洗飼料液相色譜儀色譜柱的頻率主要取決于有多少?gòu)?qiáng)殘留物質(zhì)流過(guò)色譜柱，因?yàn)榉聪嗌V柱有時(shí)會(huì)在分辨率消失或重影峰出現(xiàn)之前承受大量污染，用戶通常會(huì)等到異常情況出現(xiàn)后才開始注意。然而，污染物的過(guò)度積累會(huì)使清洗色譜柱更加困難。因此，當(dāng)經(jīng)常裝載雜質(zhì)較多的樣品時(shí)，應(yīng)定期清洗色譜柱。
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