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質(zhì)粒的作用機(jī)制、條件及特點(diǎn)

來源:安諾倫(北京)生物科技有限公司   2021年11月01日 13:25  

通常,科學(xué)家利用質(zhì)粒在靶細(xì)胞中進(jìn)行基因的過表達(dá)。質(zhì)粒的靈活性、兼容性、安全性、經(jīng)濟(jì)性等特性促進(jìn)了分子生物學(xué)家將其應(yīng)用于各種用途。一些常用的質(zhì)粒類型包括:克隆質(zhì)粒、表達(dá)質(zhì)粒、基因下調(diào)質(zhì)粒、基因敲除質(zhì)粒、報(bào)告質(zhì)粒、病毒質(zhì)粒等。


克隆質(zhì)粒:旨在擴(kuò)增目的DNA片段


表達(dá)質(zhì)粒:利用乳糖操縱子等結(jié)構(gòu)過表達(dá)目的基因基因下調(diào)質(zhì)粒:利用基因沉默(抑制mRNA翻譯)的原理減少宿主細(xì)胞內(nèi)源基因的表達(dá)


基因敲除質(zhì)粒:質(zhì)粒中可插入基因敲除所需的元件,如用CRISPR/Cas9敲除時(shí),質(zhì)粒中含有Cas9蛋白的基因序列并插入一段設(shè)計(jì)好用來轉(zhuǎn)錄出gRNA的序列;同源重組法敲除時(shí),質(zhì)粒中插入一段目的基因的上下游同源序列


報(bào)告質(zhì)粒:整合有報(bào)告基因的重組質(zhì)粒。報(bào)告基因是一種編碼可被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因,也就是說,是一個(gè)其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達(dá)調(diào)節(jié)序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,在調(diào)控序列控制下進(jìn)行表達(dá),從而利用其表達(dá)產(chǎn)物標(biāo)定目的基因的表達(dá)調(diào)控,篩選得到轉(zhuǎn)化體。

病毒質(zhì)粒:對病毒的基因組進(jìn)行改造,去除其致病感染性而保留其它功能,有利于目的基因靈活的進(jìn)入細(xì)胞并整合到基因組中。到目前為止,quan世界的科學(xué)家在各種實(shí)驗(yàn)中廣泛將質(zhì)粒用于各種技術(shù),包括熒光成像、重組DNA技術(shù)、蛋白質(zhì)大規(guī)模生產(chǎn)、疾病模擬、藥物開發(fā)和基因編輯等,其應(yīng)用之廣,使得質(zhì)粒幾乎存在于現(xiàn)在的所有生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室。


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