常見(jiàn)問(wèn)題之影響蛋白表達(dá)因素有哪些?
1.蛋白本身的特性:蛋白分子量大小、蛋白來(lái)源/物種、是否為毒性蛋白,蛋白翻譯后修飾程度、蛋白自身結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度
2.宿主的選擇:宿主本身的特性、蛋白表達(dá)需求等都影響著蛋白表達(dá)
3.蛋白需求量:蛋白應(yīng)用范圍對(duì)應(yīng)的需求量不同,所以要根據(jù)需求量確定表達(dá)系統(tǒng)
4.質(zhì)粒載體的選擇:載體是攜帶外源基因的工具,要根據(jù)系統(tǒng)選擇合適的載體才能使蛋白更好的表達(dá)
5.融合標(biāo)簽的選擇:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶
6.蛋白表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)化:重組蛋白的表達(dá)往往不像理論那樣一帆風(fēng)順,在實(shí)際的表達(dá)過(guò)程中有可能產(chǎn)生各種各樣的問(wèn)題,因此表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)化很重要。
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