高效液相色譜儀是色譜法中一個重要的儀器,以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。高效液相色譜儀應用很廣泛,基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測。目前,高效液相色譜儀已成為大多數(shù)化學行業(yè)和生命科學行業(yè)中的標準配置,如藥物研制和生產(chǎn)、蛋白質(zhì)、食品安全、環(huán)境、國土安全和石油化工等市場。
高效液相色譜儀是分析實驗室常用的測試儀器之一,其應用越來越廣泛。高效液相色譜儀在使用過程中,難免會出現(xiàn)各種各樣的問題,并將直接影響到所測數(shù)據(jù)的準確性和儀器的正常工作。
一、使用試管的問題
1、試管的潔凈問題:
高效液相色譜儀分析法是一個很靈敏的分析方法,如果因使用不潔凈的試管,便會影響試驗結(jié)果的準確性。例如,在用甲醇作溶劑來溶解樣品時,所用的小試管是用橡膠塞來做蓋子的,因此,在每次進樣時,都有一個保留時間固定的干擾峰存在,后經(jīng)證實,此干擾峰是由甲醇浸泡橡膠塞而溶下的組分所產(chǎn)生,換用玻璃試管后,干擾峰消除。
2、塑料試管的溶解問題:
近年來,一次性塑料試管給試驗人員帶來了極大的方便,但是,在使用過程中一定要注意有機溶劑對試管的溶解現(xiàn)象,在利用此種試管提取樣品時,有些有機溶劑(如氯仿等)對管壁有溶解現(xiàn)象,這些被溶解下來的物質(zhì)有時也能在檢測器上產(chǎn)生信號,從而干擾樣品的測定。這時,可用相同的實驗條件先行試驗一下,看看不含被抽提物時,提取液在檢測器上能否產(chǎn)生干擾信號,如確有干擾信號存在,就只能換用耐有機溶劑的玻璃試管了。
3、被測樣品在試管壁上的吸附問題:
這個問題也應引起注意,否則也會影響測試結(jié)果的準確性,在ZL藥物監(jiān)測中,有些被測藥物如丙咪嗪等易吸附在玻璃試管的管壁上,因此,操作中宜采用聚丙烯管,為防止提取中吸附現(xiàn)象的發(fā)生,可采用0.5%的已二胺已烷液做為提取劑,可有效地防止吸附。
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