在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。
注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的elisa試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。
ELISA試劑盒操作方法:
各種類型ELISA測(cè)定時(shí)一般需經(jīng)過這些步驟:固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。
1.重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與次接近。
2.加樣后在混勻器上充分混勻。
ELISA結(jié)果表示:
1.定性測(cè)定
2.半定量測(cè)定,結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測(cè)定,即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以絕對(duì)量或單位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
相關(guān)產(chǎn)品
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