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在人ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作中，誤差可分為系統(tǒng)誤差、偶然誤差和疏忽誤差，一個小小的錯誤想法都會影響實(shí)驗(yàn)。很多人經(jīng)常因?yàn)橐粋€小細(xì)節(jié)和一個錯誤而未能使實(shí)驗(yàn)成功。那么如何降低實(shí)驗(yàn)出錯的概率呢？除了小心，還有一些重要的點(diǎn)需要注意。
1、檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能夠熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器和儀器，具有總結(jié)分析問題的能力，及時妥善解決實(shí)驗(yàn)中的突發(fā)情況。
2、使用校準(zhǔn)過的微量移液器來消除自然誤差。移液器是否準(zhǔn)確對于定量檢測尤為重要。
3、仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范操作。不同批次的試劑不得混用。值得改進(jìn)的地方，只有經(jīng)過反復(fù)測試和確認(rèn)才能改進(jìn)。
4、*清洗。如果板沒有*清洗，酶標(biāo)的背景顏色將顯示假陽性。洗滌液應(yīng)該是新鮮的，可以直接使用。舊洗滌液的背景會增加，也可能出現(xiàn)假陽性。
5、嚴(yán)格控制反應(yīng)時間。如果反應(yīng)時間過長，酶會失活；反應(yīng)時間過短，酶聯(lián)物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定，容易洗掉，容易造成假陰性。
6、注意人ELISA試劑盒的存放期限。超過保存期限的試劑不能使用。
7、評價試劑的實(shí)用性和穩(wěn)定性對準(zhǔn)確性很重要。試劑使用前，應(yīng)對樣品進(jìn)行陰性、陽性對照及重復(fù)比對試驗(yàn)，確定試劑符合要求后方可使用。
8、嚴(yán)格控制顯色時間。如果顯色時間太短，加入終止液后底物偶聯(lián)物的量太少，反應(yīng)終止，容易出現(xiàn)假陰性。如果在顯色所需的時間后顯色，則判斷為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加入顯色劑后應(yīng)立即顯色，可能是底色顯色的結(jié)果。
9、準(zhǔn)確快速地添加樣品。如果人ELISA試劑盒加樣不準(zhǔn)確，則無法確定酶積量，直接影響顯色效果。顯色深度和數(shù)值的確定與顯色劑和終止液的用量有關(guān)，因此取樣時要小心。對于要求在一定時間內(nèi)完成加樣的實(shí)驗(yàn)，加樣緩慢，會出現(xiàn)誤差，試劑會長時間暴露，尤其是室溫過高時，存放時間會變長?？s短甚至無效。
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