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如何減少人ELISA試劑盒操作誤差?

來源:上海舒話生物科技有限公司   2021年12月13日 18:48  
  在人ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作中,誤差可分為系統(tǒng)誤差、偶然誤差和疏忽誤差,一個小小的錯誤想法都會影響實(shí)驗(yàn)。很多人經(jīng)常因?yàn)橐粋€小細(xì)節(jié)和一個錯誤而未能使實(shí)驗(yàn)成功。那么如何降低實(shí)驗(yàn)出錯的概率呢?除了小心,還有一些重要的點(diǎn)需要注意。
 

人ELISA試劑盒

 

  1、檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能夠熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器和儀器,具有總結(jié)分析問題的能力,及時妥善解決實(shí)驗(yàn)中的突發(fā)情況。
  2、使用校準(zhǔn)過的微量移液器來消除自然誤差。移液器是否準(zhǔn)確對于定量檢測尤為重要。
  3、仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范操作。不同批次的試劑不得混用。值得改進(jìn)的地方,只有經(jīng)過反復(fù)測試和確認(rèn)才能改進(jìn)。
  4、*清洗。如果板沒有*清洗,酶標(biāo)的背景顏色將顯示假陽性。洗滌液應(yīng)該是新鮮的,可以直接使用。舊洗滌液的背景會增加,也可能出現(xiàn)假陽性。
  5、嚴(yán)格控制反應(yīng)時間。如果反應(yīng)時間過長,酶會失活;反應(yīng)時間過短,酶聯(lián)物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定,容易洗掉,容易造成假陰性。
  6、注意人ELISA試劑盒的存放期限。超過保存期限的試劑不能使用。
  7、評價試劑的實(shí)用性和穩(wěn)定性對準(zhǔn)確性很重要。試劑使用前,應(yīng)對樣品進(jìn)行陰性、陽性對照及重復(fù)比對試驗(yàn),確定試劑符合要求后方可使用。
  8、嚴(yán)格控制顯色時間。如果顯色時間太短,加入終止液后底物偶聯(lián)物的量太少,反應(yīng)終止,容易出現(xiàn)假陰性。如果在顯色所需的時間后顯色,則判斷為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān)。加入顯色劑后應(yīng)立即顯色,可能是底色顯色的結(jié)果。
  9、準(zhǔn)確快速地添加樣品。如果人ELISA試劑盒加樣不準(zhǔn)確,則無法確定酶積量,直接影響顯色效果。顯色深度和數(shù)值的確定與顯色劑和終止液的用量有關(guān),因此取樣時要小心。對于要求在一定時間內(nèi)完成加樣的實(shí)驗(yàn),加樣緩慢,會出現(xiàn)誤差,試劑會長時間暴露,尤其是室溫過高時,存放時間會變長??s短甚至無效。

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