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如何減少人ELISA試劑盒操作誤差?

來源:上海舒話生物科技有限公司   2021年12月13日 18:48  
  在人ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作中,誤差可分為系統(tǒng)誤差、偶然誤差和疏忽誤差,一個(gè)小小的錯(cuò)誤想法都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。很多人經(jīng)常因?yàn)橐粋€(gè)小細(xì)節(jié)和一個(gè)錯(cuò)誤而未能使實(shí)驗(yàn)成功。那么如何降低實(shí)驗(yàn)出錯(cuò)的概率呢?除了小心,還有一些重要的點(diǎn)需要注意。
 

人ELISA試劑盒

 

  1、檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能夠熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器和儀器,具有總結(jié)分析問題的能力,及時(shí)妥善解決實(shí)驗(yàn)中的突發(fā)情況。
  2、使用校準(zhǔn)過的微量移液器來消除自然誤差。移液器是否準(zhǔn)確對(duì)于定量檢測(cè)尤為重要。
  3、仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范操作。不同批次的試劑不得混用。值得改進(jìn)的地方,只有經(jīng)過反復(fù)測(cè)試和確認(rèn)才能改進(jìn)。
  4、*清洗。如果板沒有*清洗,酶標(biāo)的背景顏色將顯示假陽(yáng)性。洗滌液應(yīng)該是新鮮的,可以直接使用。舊洗滌液的背景會(huì)增加,也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。
  5、嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間。如果反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng),酶會(huì)失活;反應(yīng)時(shí)間過短,酶聯(lián)物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定,容易洗掉,容易造成假陰性。
  6、注意人ELISA試劑盒的存放期限。超過保存期限的試劑不能使用。
  7、評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性和穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確性很重要。試劑使用前,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行陰性、陽(yáng)性對(duì)照及重復(fù)比對(duì)試驗(yàn),確定試劑符合要求后方可使用。
  8、嚴(yán)格控制顯色時(shí)間。如果顯色時(shí)間太短,加入終止液后底物偶聯(lián)物的量太少,反應(yīng)終止,容易出現(xiàn)假陰性。如果在顯色所需的時(shí)間后顯色,則判斷為假陽(yáng)性,這可能與試劑本身有關(guān)。加入顯色劑后應(yīng)立即顯色,可能是底色顯色的結(jié)果。
  9、準(zhǔn)確快速地添加樣品。如果人ELISA試劑盒加樣不準(zhǔn)確,則無法確定酶積量,直接影響顯色效果。顯色深度和數(shù)值的確定與顯色劑和終止液的用量有關(guān),因此取樣時(shí)要小心。對(duì)于要求在一定時(shí)間內(nèi)完成加樣的實(shí)驗(yàn),加樣緩慢,會(huì)出現(xiàn)誤差,試劑會(huì)長(zhǎng)時(shí)間暴露,尤其是室溫過高時(shí),存放時(shí)間會(huì)變長(zhǎng)。縮短甚至無效。

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