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在人ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作中，誤差可分為系統(tǒng)誤差、偶然誤差和疏忽誤差，一個(gè)小小的錯(cuò)誤想法都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。很多人經(jīng)常因?yàn)橐粋€(gè)小細(xì)節(jié)和一個(gè)錯(cuò)誤而未能使實(shí)驗(yàn)成功。那么如何降低實(shí)驗(yàn)出錯(cuò)的概率呢？除了小心，還有一些重要的點(diǎn)需要注意。
1、檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能夠熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器和儀器，具有總結(jié)分析問題的能力，及時(shí)妥善解決實(shí)驗(yàn)中的突發(fā)情況。
2、使用校準(zhǔn)過的微量移液器來消除自然誤差。移液器是否準(zhǔn)確對(duì)于定量檢測(cè)尤為重要。
3、仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范操作。不同批次的試劑不得混用。值得改進(jìn)的地方，只有經(jīng)過反復(fù)測(cè)試和確認(rèn)才能改進(jìn)。
4、*清洗。如果板沒有*清洗，酶標(biāo)的背景顏色將顯示假陽(yáng)性。洗滌液應(yīng)該是新鮮的，可以直接使用。舊洗滌液的背景會(huì)增加，也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。
5、嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間。如果反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)，酶會(huì)失活；反應(yīng)時(shí)間過短，酶聯(lián)物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定，容易洗掉，容易造成假陰性。
6、注意人ELISA試劑盒的存放期限。超過保存期限的試劑不能使用。
7、評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性和穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確性很重要。試劑使用前，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行陰性、陽(yáng)性對(duì)照及重復(fù)比對(duì)試驗(yàn)，確定試劑符合要求后方可使用。
8、嚴(yán)格控制顯色時(shí)間。如果顯色時(shí)間太短，加入終止液后底物偶聯(lián)物的量太少，反應(yīng)終止，容易出現(xiàn)假陰性。如果在顯色所需的時(shí)間后顯色，則判斷為假陽(yáng)性，這可能與試劑本身有關(guān)。加入顯色劑后應(yīng)立即顯色，可能是底色顯色的結(jié)果。
9、準(zhǔn)確快速地添加樣品。如果人ELISA試劑盒加樣不準(zhǔn)確，則無法確定酶積量，直接影響顯色效果。顯色深度和數(shù)值的確定與顯色劑和終止液的用量有關(guān)，因此取樣時(shí)要小心。對(duì)于要求在一定時(shí)間內(nèi)完成加樣的實(shí)驗(yàn)，加樣緩慢，會(huì)出現(xiàn)誤差，試劑會(huì)長(zhǎng)時(shí)間暴露，尤其是室溫過高時(shí)，存放時(shí)間會(huì)變長(zhǎng)。縮短甚至無效。
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