能量來源：谷氨酰胺
L－谷氨酰胺是一種氨基酸，細(xì)胞的重要能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。同時(shí)L-谷氨酰胺不穩(wěn)定，在中性的水溶液中會(huì)自發(fā)降解； 降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞有毒性 （對(duì)干細(xì)胞，原代細(xì)胞影響尤其大）。能影響細(xì)胞活性、蛋白表達(dá)水平及糖基化模式等。那如何解決呢？

方案有二：

選擇不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基，自己添加

選擇穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物

經(jīng)過科學(xué)家不斷努力，終于找到了穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物： glutaGRO。它有何方功能呢？原來，它是由L-丙氨酸和L-谷氨酰胺縮合形成的二肽，穩(wěn)定性高，可在室溫下保存，2年穩(wěn)定 （谷氨酰胺需冷凍保存），使用更方便。同時(shí)不易降解，不產(chǎn)生有毒性氨，更利于細(xì)胞生長(zhǎng)。但仍需注意：該替代物適于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，但不適合昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)體系?。?！

能量來源 : 丙酮酸 (Sodium Pyruvate)
丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源。當(dāng)葡萄糖不足的時(shí)候，細(xì)胞可以代謝丙酮酸鈉，保證細(xì)胞更好地生長(zhǎng)。同時(shí)某些對(duì)葡萄糖利用存在問題的細(xì)胞必需添加哦。

平衡鹽溶液

平衡鹽溶液主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成；它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)；同時(shí)用于取材時(shí)組織塊的漂洗、細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。

它由這些小伙伴組成：PBS 磷酸鹽緩沖液，DPBS（Dulbecco’s Phosphate-Buffered Salines）， Earle’s 平衡鹽， Hank’s 平衡鹽。

培養(yǎng)基中的pH緩沖劑

絕大多數(shù)細(xì)胞的最佳生長(zhǎng)條件是pH 6.8-7.8。

多數(shù)培養(yǎng)基利用碳酸氫鈉進(jìn)行緩沖，碳酸氫鈉的緩沖需要二氧化碳。其中高碳酸氫鈉 (1.5 – 3.7g/L) 需要 5 – 10% CO2，低碳酸氫鈉(0.35g/L) 不需要二氧化碳孵箱。當(dāng)然，也有不依賴于二氧化碳的氫離子緩沖劑如：HEPES，在一定范圍內(nèi)對(duì)細(xì)胞無毒性作用。能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍，保證細(xì)胞的良好生長(zhǎng)。大家可以根據(jù)細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)要求具體選擇。