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ELISA試劑盒操作細節(jié)常見問題整理

來源:重慶市華雅干細胞技術(shù)有限公司   2022年01月06日 15:47  
1)問:是不是空白對照就是什么都不加?  
答:不加樣本,不加樣本稀釋液,不加酶標試劑,其他都可以加。  
2)問:樣本稀釋液是配好的嗎?  
答:樣本稀釋液是配好的。  
3)問:樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎?  
答:可以的,直接加40ul就可以了。  
4)問:洗滌液是濃縮的;是一次配好,還是現(xiàn)配現(xiàn)用?謝謝。  
答:濃縮的,現(xiàn)配現(xiàn)用。  
5)問:加入的顯色液A\B分別是什么物質(zhì)?作用原理?  
答:顯色劑A和B,是經(jīng)典的TMB顯色系統(tǒng)。具體原理可以參考免疫方面的教科書。在這里不詳細列出。  
6)問:終止液是什么物質(zhì)?如何做到終止反應(yīng)的?  
答:終止液是2mol的硫酸溶劑。終止反應(yīng)也是和原理相關(guān)。這個參考教科書!  
7)問:稀釋液是什么成分?  
答:標準稀釋液是PBS(PH=7.2-7.4,濃度是0.01mol/L)。樣本稀釋液是含有0.5%BSA的PBS(PH=7.2-7.4,濃度是0.01mol/L)。  
8)問:需要避光保存的試劑是哪個?  
答:需要避光的是顯色液B。  
9)問:試劑盒從冰箱取出后,室溫放置會影響其效果嗎?  
答:試劑盒在做實驗前應(yīng)該要室溫平衡一小時。短時間(3、4小時)沒有任何影響。  
10)問:樣品研磨后是立即離心,還是在4度冰箱里提取幾個小時以后再離心?  
答:樣本研磨后立即離心即可。  
補充:5%BSA封閉液(BlockingBuffer)適用于WesternBlotting、ELISA以及免疫組化實驗中非特異性蛋白結(jié)合位點的封閉。

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