簡要描述：

RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉(zhuǎn)染試劑用于哺乳動物細胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。

一、產(chǎn)品說明：

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號：AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格：0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、儲存條件

常溫運輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復(fù)凍融。

二、RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染質(zhì)粒8100bp效果圖和轉(zhuǎn)染條件

轉(zhuǎn)染條件

質(zhì)粒DNA大?。?100bp

培養(yǎng)板：6孔板

轉(zhuǎn)染試劑用量：6ul

質(zhì)粒DNA用量：電訊

轉(zhuǎn)染試劑：Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑

轉(zhuǎn)染時間：48小時

血清：Z7010FBS-500澳洲胎牛血清

細胞凍存：CE70100T無血清細胞凍存液

三、RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉(zhuǎn)染試劑操作步驟：

材料準(zhǔn)備

RNA 濃度 20 uM /L

質(zhì)粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無菌雙蒸水或超純水；②無內(nèi)毒素 ）

提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右，再進行轉(zhuǎn)染。

核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物：根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復(fù)合物，并輕輕混勻；細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細胞換液：轉(zhuǎn)染 24 小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。

分析結(jié)果：質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率，48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選，則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率，48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。