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看食品檢測幫助運動員避免瘦肉精事件

來源:??萍瘓F股份有限公司   2022年01月27日 10:11  

目前,來源于肉類食品的飲食污染、其他食品或藥物誤服而導致的食源性困擾事件層出不窮,食源性的預防控制也成為各類體育賽事管理機構(gòu)和供應服務(wù)基地保障的重要內(nèi)容。

 

食源性

食源性是指來源于食品中的興奮,包括一般性食品及保健食品中從生產(chǎn)到加工過程中天然存在或故意添加而殘留的成分,如肉類食品多次被爆出的“瘦肉精”。“瘦肉精”是一大類藥物的總稱從的分類來看,它屬于β-腎上腺素受體激動劑??藗愄亓_、沙丁胺醇、萊克多巴胺是常見的三種在畜牧養(yǎng)殖使用的“瘦肉精”,同時也是常見的人為服用。[1]世界反機構(gòu)在其2021年的指導性文件里特別指出,如果克倫特羅、萊克多巴胺等四種違禁物質(zhì)的陽性結(jié)果顯示濃度低于5納克/毫升,他們將進行調(diào)查。[2]

 

成分檢測儀器靈敏度及相應物質(zhì)的檢測標準的不斷提升、新技術(shù)的應用為反管理機制提供了堅強保障。有關(guān)單位通過開展微生物檢驗、樣品制備管理等,高質(zhì)量、高標準、高效率開展食品檢驗檢測工作,監(jiān)測評估食品安全風險,竭力保障食源性“零檢出”,使運動員得以安心訓練備戰(zhàn)。[3]

 

食品中4種瘦肉精類殘留量測定

依據(jù)《GB/T 22286-2008 動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》,試樣中的β-激動劑經(jīng)過酶解,用高氯酸調(diào)節(jié)pH值,沉淀蛋白后離心,上清液用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH后用異丙醇-乙酸乙酯提取,用陽離子交換柱凈化,采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進行測定,內(nèi)標法定量。

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儀器和耗材

儀器

Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀;

Auto EVA 60全自動平行濃縮儀;

Agilent 1290II/6470 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

MCX固相萃取柱(RayCure,60mg/3mL)

 

全自動固相萃取儀

 

全自動氮吹濃縮儀

 

試劑

乙酸乙酯、異丙醇、甲醇均為色譜純;甲酸、高氯酸、氨水、氫氧化鈉;β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶。

0.2mol/L乙酸鈉緩沖液:稱取13.6g乙酸鈉,溶解于500ml水中,用適量乙酸調(diào)節(jié)pH至5.2。

標準品:萊克多巴胺鹽酸鹽,克倫特羅鹽酸鹽,沙丁胺醇,特布他林硫酸鹽,100ng/ml。

內(nèi)標物:沙丁胺醇-D3,克倫特羅-D9,10ng/ml。 

樣品制備

酶解

準確稱取5g(精確到0.01g)經(jīng)搗碎的樣品于50mL離心管內(nèi),加入0.2moL/L乙酸鈉溶液(pH=5.2)20mL,再加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶100μL,漩渦混勻,于37℃下避光水浴水解12h。

2 提取

添加1ml的內(nèi)標工作液于待測樣品中,加蓋置于水平振蕩器震蕩15min,5000r/min高速離心10min,準確取10mL上清液于另一50mL離心管中,用高氯酸調(diào)節(jié)PH至1.0±0.3,4000r/min離心5min,將上清液轉(zhuǎn)移至另一50mL離心管中,用10moL/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至11,加入4~5g氯化鈉,加入異丙醇:乙酸乙酯=6:4 15mL,充分提取,4000r/min離心5min,吸取全部有機相到??迫詣拥禎饪s儀EVA-60plus 50℃下氮氣吹干,加入0.2M乙酸銨溶液5mL溶解,超聲混勻,使殘渣充分溶解后備用。

3 凈化

MCX固相萃取柱安裝在Raykol Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀上,依次用甲醇3 mL、水3 mL活化。備用液全部過柱,用水2 mL、2%甲酸水2ml、甲醇2 mL依次淋洗,抽干,用5%氨水甲醇溶液2 mL洗脫,收集洗脫液,使用EVA-60plus全自動氮吹濃縮儀于40℃水浴氮氣吹干,用10%乙腈水溶液(含0.1%甲酸)1.0 mL溶解,濾過,液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。具體的固相萃取方法見圖。

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結(jié)果與討論

為了驗證該方法的回收率,本實驗分別在豬肉樣品中加入鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、特布他林4種混合標準品進行加標回收驗證(n=3),加標水平為0.5ug/kg,數(shù)據(jù)如表-2所示。加標回收率在87.8-112.4%之間,RSD值控制在10%以內(nèi)。說明該方法能夠很好地運用于豬肉中瘦肉精殘留量的檢測。

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-2.豬肉樣品加標回收率及RSD值

注:其中克倫特羅的內(nèi)標為克倫特羅-D9;沙丁胺醇、特布他林與萊克多巴胺的內(nèi)標為沙丁胺醇-D3。

 

本解決方案操作方便、提取和濃縮效率高、回收率好。符合GB/T 22286-2008《動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》要求。

 

食源性的風險控制不僅要依靠檢測標準,還應借鑒“預防為主”原則,加強“從農(nóng)田到餐桌”整個鏈條中食品安全的監(jiān)控,與時俱進的檢測方法和技術(shù)手段的應用利于防止誤食事件的發(fā)生,運動員得以吃得健康、吃得安心。

 

參考文獻

[1]黃煒:運動員冬奧會期間不要吃中國肉!反興奮機構(gòu)又來了……,觀察者網(wǎng)

[2]冬奧會食品符合食源性興奮零檢出特殊要求,新華每日電訊/2022 /1 /19 /006

[3]嚴字當頭零容忍全力以赴零出現(xiàn)”——心懷國之大者,反興奮中心備戰(zhàn)北京冬奧會,國家體育總局反興奮中心

 

 

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