在傳統(tǒng)報告基因檢測系統(tǒng)中，大多數(shù)使用的是螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶閃光型(flash type)檢測體系，但其發(fā)光信號的半衰期較短，穩(wěn)定性不佳等缺點，會對實驗結果和使用造成影響。針對傳統(tǒng)閃光型螢光素的不足，翌圣生物經(jīng)過潛心研究開發(fā)出新一代的操作更便捷、半衰期更長、穩(wěn)定性更好的輝光型(glow type)螢光素酶檢測系統(tǒng)，適用于如哺乳動物細胞、原生質體等樣本。

螢光素酶報告基因檢測檢測原理示意圖

以下是閃光型(flash type)與輝光型(glow type)對比情況：

閃光型(flash type)操作流程，較為繁瑣

輝光型(glow type)操作流程，一步完成檢測

Yeasen檢測系統(tǒng)螢光強度和穩(wěn)定性與P品牌相當

Yeasen檢測系統(tǒng)和螢光素酶相互作用，螢光素發(fā)光淬滅效果與P品牌相當

A：室溫條件（20-22℃）。反應組分如細胞裂解產(chǎn)物，底物工作液等都需要調整到室溫，因為兩種螢光素酶的反應速率是受溫度影響，為了保證實驗一致性，推薦反應室溫調至室溫。

A：1）螢火蟲螢光素酶建議選取pGL-3或pGL-4或者自己構建的載體。

2）海腎螢光素酶建議選取pRL-TK或pGL-4載體或者自己構建相應的載體。建議優(yōu)先選用中等強度的啟動子（如TK），而不使用強啟動子（如SV40、CMV），以免影響主報告基因的表達，或進行實驗摸索選擇合適的載體。

A：推薦對照組螢火蟲和海腎螢光素酶的讀值接近，或者海腎螢光素酶比螢火蟲螢光素酶的讀值略高。實際實驗過程中，由于螢火蟲螢光素酶質粒和海腎螢光素酶的質粒抽提的質量不一致，待檢測目的調控元件的調控能力的不同等原因，我們推薦預實驗優(yōu)化螢火蟲螢光素酶質粒和海腎螢光素酶質粒的共轉染量。

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