小鼠B因子(BF)elisa檢測(cè)試劑盒?雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
小鼠B因子(BF)elisa檢測(cè)試劑盒雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原):
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
戶須知
1、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等);
2、樣本保存:請(qǐng)盡早檢測(cè),2-8℃保存一天;需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,置-20℃或-70℃保存;
3、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)及其他特殊要求。
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