蛋白酶K，是一種備受青睞的廣譜蛋白酶，被認(rèn)為是活性高的蛋白酶。蛋白酶K具有出色的穩(wěn)定性，在高溫、高鹽、較高的pH或一些常見抑制劑等條件下仍能保持較高活性，但這并不代表蛋白酶K的活性不受外界因素影響，本文將介紹影響蛋白酶K活性的因素。

蛋白酶K活性受pH的影響 

蛋白酶 K 在較廣的pH范圍（4?12.5)均有活性，但也受pH的影響。其催化活性在 pH 6-10范圍內(nèi)保持穩(wěn)定，在pH 8-10內(nèi)大幅增加。 在 pH 3.5-9.0，蛋白酶K分子的三維結(jié)構(gòu)對(duì) pH 的變化不敏感，但在過(guò)酸、過(guò)堿性環(huán)境中將發(fā)生不可逆變性。

 溫度對(duì)蛋白酶K活力的影響

蛋白酶 K 在 20 ℃-60 ℃范圍內(nèi)保留超過(guò) 80 %的高活性，在37 ℃時(shí)酶活力大。 65 ℃保溫10min-15min可部分失活，95 ℃加熱 10 min，則會(huì)導(dǎo)致蛋白酶K*失活。

Ca²⁺對(duì)蛋白酶 K 活力的影響

天然蛋白酶 K 結(jié)合著兩個(gè) Ca²⁺。去除 Ca²⁺會(huì)降低酶的熱穩(wěn)定性和一定程度的底物親和力，但對(duì)酶的催化活性沒有影響。 天然的和去除 Ca²⁺的蛋白酶 K 具有相似的結(jié)構(gòu)性質(zhì)； 蛋白酶 K 中的一些氫鍵和鹽橋在維持兩個(gè)Ca²⁺位點(diǎn)周圍的構(gòu)象上起關(guān)鍵作用。

激活劑和抑制劑對(duì)蛋白酶 K 活力的影響

在螯合劑 EDTA、 巰基試劑、 對(duì)氯汞苯甲酸 （PCMB）、N―甲苯磺酰―L―賴氨酰―氯甲基酮（TLCK）或 甲苯磺酰―苯丙氨酸氯甲基酮（TPCK）存在下，蛋白酶 K 仍可保持穩(wěn)定和活力，而變性劑如尿素、SDS可提高它的催化活性。 不過(guò)，蛋白酶 K 屬于絲氨酸蛋白酶類，其活力可被苯j(luò)ia基磺酰氟（PMSF）或二異丙基氟磷酸（DFP）抑制。

綜上，pH、溫度、Ca²⁺、激活劑和抑制劑等是影響蛋白酶 K 活力的主要因素。